添加甘藍8號染色體片段的大白菜易位系的獲得及其遺傳穩(wěn)定性分析.pdf

1、為創(chuàng)建大白菜—結(jié)球甘藍易位系，本試驗以大白菜—結(jié)球甘藍8號單體異附加系(AC8)為試材，采用60Co-γ射線對其花粉進行輻射，對輻射后獲得的M1植株進行自交和回交，并對自交和回交后代進行游離小孢子培養(yǎng)，同時對M2自交獲得M3。利用InDel分子標(biāo)記對輻射M3代和M1自交與回交后代小孢子植株進行鑒定，結(jié)合細胞學(xué)觀察，獲得了兩個添加甘藍8號染色體片段的大白菜易位系‘AT8-1’與‘AT8-2’，并對易位系后代進行遺傳穩(wěn)定性分析、田間性狀調(diào)查

2、和營養(yǎng)品質(zhì)分析，為大白菜育種提供了新的種質(zhì)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.本試驗通過對AC8輻射后代進行小孢子培養(yǎng)和自交獲得后代群體，利用實驗室篩出的286個結(jié)球甘藍相對于大白菜的特異InDel分子標(biāo)記對小孢子植株和自交后代進行鑒定，結(jié)合染色體減數(shù)分裂觀察，獲得了2個添加甘藍8號染色體片段的大白菜易位系‘AT8-1’和‘AT8-2’?！瓵T8-1’來自AC830Gy輻射M1回交后代的小孢子植株;‘AT8-2’來自AC830Gy輻射自

3、交后代M3。2個易位系的特異標(biāo)記均為甘藍C03連鎖群的10個連續(xù)標(biāo)記。同時對未經(jīng)輻射的AC8自交后代中具有甘藍特異InDel標(biāo)記的植株進行了小孢子培養(yǎng)，并對小孢子植株進行了分子標(biāo)記鑒定，未能獲得具有甘藍特異標(biāo)記的小孢子植株。
　　2.大白菜易位系‘AT8-1’和‘AT8-2’具有相同的甘藍特異InDel標(biāo)記，為確定甘藍易位片段大小，對兩端的標(biāo)記進行加密設(shè)計，加密后的PCR結(jié)果表明，2個大白菜易位系中外源染色體片段為甘藍03連鎖群3

4、1117882bp到57768834bp（連鎖群末端）之間，大小約為26651kb。
　　3.對大白菜易位系‘AT8-1’進行自交、與二倍體大白菜親本回交，以及與2個不同大白菜自交系進行雜交，利用InDel分子標(biāo)記鑒定易位系后代的遺傳穩(wěn)定性，結(jié)果表明該易位系中甘藍染色體片段不穩(wěn)定，‘AT8-1’自交后代中甘藍染色體片段的傳遞率為61.1％，回交后代中甘藍染色體片段的傳遞率為26.3％，兩個雜交后代群體分別為24.2％與30.0％。

5、易位系‘AT8-2’自交后代甘藍染色體片段的傳遞率為52.9％。2個易位系后代群體中均未見易位片段變小的植株。
　　4.對易位系‘AT8-1’后代進行田間性狀調(diào)查和營養(yǎng)品質(zhì)測定。結(jié)果表明，‘AT8-1’后代可分為含甘藍染色體片段和不含甘藍染色體片段兩類，且每類植株性狀較為一致，驗證了易位系白菜背景為純合。兩類植株在田間性狀和營養(yǎng)成分含量上有一定差異，易位系自交和回交后代中含甘藍易位片段的植株不結(jié)球，雜交后代中含甘藍易位片段植株的葉