體外構(gòu)建組織工程化口腔粘膜的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:1.應(yīng)用組織工程的方法,探討研制一種適合于臨床應(yīng)用的組織工程化復(fù)合粘膜2.比較兩種生物支架材料PGA及Alloderm在構(gòu)建口腔粘膜組織方面的優(yōu)劣方法:體外培養(yǎng)、擴(kuò)增狗口腔粘膜上皮細(xì)胞,通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)及角蛋白免疫組化染色等對(duì)細(xì)胞進(jìn)行定性研究;通過(guò)測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線及群體倍增時(shí)間,了解細(xì)胞生長(zhǎng)基本規(guī)律及其增殖能力.將培養(yǎng)的狗口腔粘膜上皮細(xì)胞接種于AlloDerm上,構(gòu)建組織工程化狗口腔粘膜,通過(guò)HE染色觀察組織形態(tài),免疫組化染色檢測(cè)p

2、63和Ki67;體外培養(yǎng)、擴(kuò)增人口腔粘膜上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞,通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)及角蛋白、波形蛋白免疫組化染色等對(duì)細(xì)胞進(jìn)行定性研究;通過(guò)測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線及群體倍增時(shí)間了解細(xì)胞生長(zhǎng)基本規(guī)律及其增殖能力.用MTT法檢測(cè)口腔粘膜上皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞在PGA上的增殖情況,研究其生物相容性.將培養(yǎng)的人口腔粘膜成纖維細(xì)胞接種于PGA上,培養(yǎng)7天后再接種上皮細(xì)胞于表面,體外形成活的粘膜樣組織.通過(guò)HE染色觀察組織形態(tài),用Masson染色觀察膠原分布和形態(tài)