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文檔簡介
1、大型海藻石莼、滸苔在我國沿海資源量較多,但目前尚未找到有效的利用途徑;龍須菜目前主要用于提煉瓊膠,但仍有大量殘次的龍須菜沒有被利用。這些低值、殘次海藻殘留近海不僅是資源的巨大浪費(fèi),其腐爛物還會(huì)帶來嚴(yán)重的環(huán)境污染。近年來,人們發(fā)現(xiàn),大型海藻富含海藻多糖、礦物質(zhì)、維生素、游離氨基酸、脂肪酸、天然色素及未知生長因子(UGF)等營養(yǎng)成分,可以作為水產(chǎn)動(dòng)物配合飼料的原料加以利用,能夠部分減少魚粉、豆粕、小麥淀粉等原料的用量降低飼料成本,但是由于海
2、藻含有大量的抗?fàn)I養(yǎng)因子(如非淀粉多糖),飼料中添加海藻后易引起水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)飼料的消化率以及生長性能下降,大型海藻在配合飼料中的添加比例一般不超過10%-15%。我們的前期研究表明,石莼、龍須菜、滸苔適合做為黃斑藍(lán)子魚配合飼料的原料加以利用,添加量可以達(dá)到5%,在加入0.2%商品酶制劑(非淀粉多糖復(fù)合酶)的情況下添加量可以達(dá)到10%,說明酶制劑可以提高藍(lán)子魚對(duì)海藻的利用能力。為了進(jìn)一步探討非淀粉多糖酶對(duì)海藻的酶解效果及其在海藻飼料中的適宜添
3、加量,研發(fā)藍(lán)子魚的高效低成本海藻配合飼料,本論文設(shè)計(jì)了三個(gè)實(shí)驗(yàn)開展研究,主要結(jié)果如下:
1.非淀粉多糖酶對(duì)三種海藻的體外消化效果比較
為比較纖維素酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶等非淀粉多糖酶對(duì)石莼(Ulva Pertusa)、龍須菜(Gracilaria lemaneiformis)、滸苔(Enteromorpha Linza)等海藻的酶解效果及其在藻粉中適宜添加量。首先采用不同濃度的單酶進(jìn)行體外消化實(shí)驗(yàn),得到單酶適宜添
4、加量后按照單酶適宜添加量的25%、50%、75%和100%進(jìn)行混合酶解實(shí)驗(yàn)。單酶消化實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示每克藻粉中纖維素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶的適宜添加量在石莼分別為120 U、80 U和160 U,龍須菜分別為160 U、160 U和240 U,滸苔分別為160 U、120 U和160 U?;旌厦附饨Y(jié)果顯示,按三種單酶適宜添加量的75%混合時(shí)可達(dá)到最佳消化效果,即在石莼、龍須菜、滸苔的藻粉中,三種酶混合適宜添加量分別為90 U+60 U+
5、120 U,120 U+120 U+180 U,120 U+90 U+120 U。酶解后酶解液中還原糖含量由高到低依次為龍須菜、石莼、滸苔。結(jié)果顯示,三種酶對(duì)石莼和龍須菜有較好的酶解效果,對(duì)滸苔的酶解效果相對(duì)較差。
2.石莼飼料中添加非淀粉多糖酶對(duì)黃斑藍(lán)子魚生長、飼料消化率及肌肉營養(yǎng)品質(zhì)的影響
為探討酶制劑是否有助于提高黃斑藍(lán)子魚對(duì)石莼海藻飼料的消化利用率,在總蛋白水平為32%、總脂肪水平為8%情況下配置6種飼料,未
6、添加石莼的基礎(chǔ)飼料設(shè)為對(duì)照飼料1(C1),添加15%石莼干粉的飼料設(shè)為對(duì)照飼料2(C2),另外4種添加15%石莼干粉和不同劑量非淀粉多糖復(fù)合酶設(shè)為實(shí)驗(yàn)飼料(T1-T4)。以上述6種飼料飼養(yǎng)黃斑藍(lán)子魚幼魚8周,通過比較不同飼料組魚的生長性能、消化酶活性及飼料表觀消化率等,以評(píng)估酶制劑的效果。結(jié)果顯示:T1-T4飼料組魚的增重率、特定生長率、蛋白質(zhì)效率等均高于C2飼料組魚,且與C1飼料組魚無顯著差異(T4飼料組魚的蛋白質(zhì)效率除外)(P>0.
7、05)。全魚生化成分及胃、前腸、肝臟的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性在各組之間無顯著差異(P>0.05)。T1-T4組魚對(duì)飼料蛋白質(zhì)的表觀消化率顯著高于C2組魚(P<0.05)。與C1組魚相比,C2和T1-T4組魚肌肉中的18:2n6,20:5n3,22:5n3及蛋氨酸、酪氨酸顯著降低,而組氨酸、谷氨酸顯著升高,其它脂肪酸和氨基酸無明顯差異。結(jié)果表明,石莼飼料中添加非淀粉多糖酶可提高藍(lán)子魚的生長效果和飼料利用率,飼料中添加海藻對(duì)魚肉的營養(yǎng)成
8、分有一定的影響,而風(fēng)味氨基酸谷氨酸顯著增加。
3.不同海藻飼料添加非淀粉多糖酶對(duì)黃斑藍(lán)子魚生長、抗菌力以及肌肉營養(yǎng)成分的影響
在上述兩次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上,本研究制作了7種等蛋等脂飼料。沒有添加海藻的基礎(chǔ)飼料為對(duì)照飼料(C1),另外六種添加海藻的飼料設(shè)為試驗(yàn)飼料(T1-T6)。其中, T1、T3、T5分別添加12%的滸苔、龍須菜、石莼干粉,T2、T4、T6是在T1、T3、T5對(duì)應(yīng)飼料的基礎(chǔ)上再添加相同量的非淀粉多糖復(fù)合
9、酶:纖維素酶165U/g、木聚糖酶135 U/g、β葡聚糖酶195 U/g(酶活力與海藻質(zhì)量之比)。用上述7種飼料對(duì)黃斑藍(lán)子魚幼魚(3.5g左右)開展11周養(yǎng)殖試驗(yàn)后,用105 cfu/ml的副溶血弧菌(V. parahaemolyticus)通過肌肉注射方式(10-2 ml/g)對(duì)試驗(yàn)魚進(jìn)行攻毒試驗(yàn),并統(tǒng)計(jì)7天內(nèi)累積死亡率,通過比較不同飼料組魚的生長性能,血清非特異性免疫指標(biāo),死亡率,肌肉氨基酸、脂肪酸以及飼料成本等,評(píng)估各種海藻配合
10、飼料的效果。結(jié)果顯示:添加有非淀粉多糖復(fù)合酶的海藻飼料(T1、T3、T5)組魚的生長性能均顯著高于對(duì)應(yīng)的沒有添加酶的海藻飼料(T2、T4、T6)組魚的生長性能且與對(duì)照組無顯著差異,其中T4組(龍須菜加酶)魚的生長性能最好并略高于對(duì)照組。全魚生化成分,肌肉氨基酸、脂肪酸在各組之間無顯著差異。攻毒7天后累計(jì)死亡率,對(duì)照組為25%,滸苔飼料組15%左右,龍須菜飼和石莼飼料組為8%左右,其中龍須菜和石莼飼料組顯著低于對(duì)照組。海藻組魚血清溶菌酶、
11、超氧化物歧化酶以及酸性磷酸酶均顯著高于對(duì)照飼料組魚。結(jié)果表明:黃斑藍(lán)子魚飼料中添加12%海藻(滸苔、龍須菜、石莼)和一定量的非淀粉多糖酶可獲得較好的生長性能和魚肉品質(zhì),并有助于提高魚體的健康水平。三種加酶海藻飼料的成本低于魚粉對(duì)照組,每噸飼料成本至少降低500元以上,考慮到龍須菜具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,滸苔和石莼或殘次龍須菜尚未被較好利用,它們可以被開發(fā)為黃斑藍(lán)子魚高效低成本海藻飼料加以利用。
本研究首次評(píng)價(jià)了纖維素酶、木聚糖酶以
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