百合鱗莖休眠進程中淀粉粒亞顯微結(jié)構(gòu)變化與酚類物質(zhì)成分分析.pdf

1、為深入研究百合鱗莖休眠生理、為休眠機制研究提供理論依據(jù)，本試驗在前期生理生化分析的基礎(chǔ)上，利用掃描電子顯微鏡(Scan Electron Microscope，SEM)對蘭州百合(Lilium davidii var．unicolor)發(fā)育和休眠過程中鱗片淀粉粒亞顯微結(jié)構(gòu)的變化進行了觀察，并對低溫貯藏期間百合鱗莖不同部位的酚類物質(zhì)進行了定性與定量分析，以期明確與百合鱗莖休眠密切相關(guān)的淀粉及酚類物質(zhì)的變化規(guī)律和相互關(guān)系。主要研究結(jié)果如下：

2、 1．百合鱗莖發(fā)育進入休H民過程中，鱗片的淀粉粒數(shù)量與形念發(fā)生著明顯變化，但依栽植種球的大小不同，其變化趨勢存在差異。對小規(guī)格的栽植種球(平均重量7.5 g)而言，栽種期大維管束周圍細胞中有少量淀粉粒游離在細胞腔內(nèi)，并有絮狀物存在。隨著鱗莖的發(fā)育，淀粉粒數(shù)量顯著增加，在植株半枯期達到最大，形狀由紡錘形漸變?yōu)榻鼒A形；處于大小維管束中心位置的細胞，其淀粉粒數(shù)量明顯少于大維管束周圍細胞中淀粉粒數(shù)量，并且在營養(yǎng)生長期和花蕾透色期，淀粉粒

3、表面有裂紋存在。對于平均重量為29.2g的大種球而言，栽種期大維管束周圍細胞內(nèi)淀粉粒充滿整個細胞腔，呈長橢圓形，體積較大，表明沒有紋路；幼苗期至現(xiàn)蕾期淀粉粒數(shù)量逐漸下降，以大小淀粉粒結(jié)合的形態(tài)存在于細胞腔內(nèi)；花蕾透色期至全枯期淀粉粒數(shù)量呈增加趨勢。大小維管束中心細胞內(nèi)的淀粉粒數(shù)量與變化趨勢與大維管束周圍細胞相比沒有顯著差異。 2．低溫解除休眠過程中，鱗片內(nèi)的淀粉粒數(shù)量呈遞減趨勢。大維管束周圍的細胞中的淀粉粒數(shù)量在0～20 d變化

4、不明顯，貯藏后20～40 d數(shù)量逐漸減少，40～50 d內(nèi)淀粉粒數(shù)量較少，變化幅度不大，而50～60 d淀粉粒的數(shù)量稍有回升。在同一取樣時期，大小維管束中心細胞內(nèi)淀粉粒數(shù)量的變化與大維管束周圍細胞的變化情況基本一致。兩個部位大多數(shù)的淀粉粒游離在細胞腔中，以與小顆粒結(jié)合的形式存在。同時發(fā)現(xiàn)在不同時期不同部位仍有絮狀物存在。 3．建立了分離七種酚類物質(zhì)的高效液相色譜條件。采用’Waters Nova-PakC18色譜柱(3.9 mm

5、i.d.×150 mm，4μm)，柱溫35℃，流動相為乙腈1％(V/V)乙酸水溶液(體積比為15：85)，流速1.0 ml/min，紫外檢測波長280nm，進樣量15 μl，可使七種酚類物質(zhì)在20 min內(nèi)達到完全分離。在上述優(yōu)化條件下，對低溫貯減期間百合鱗莖各個部位酚類物質(zhì)的種類進行了鑒定，主要酚類物質(zhì)包括：對羥基苯甲酸、阿魏酸、香豆酸、水楊酸、香豆素。頂芽是酚類物質(zhì)分布最集中的部位。 4．對酚類物質(zhì)含量的測定結(jié)果表明，鱗莖盤

6、內(nèi)的含量最高，頂芽次之，鱗片內(nèi)的含量最低。其中對羥基苯甲酸的含量顯著高于其它種類酚類物質(zhì)的含量，最高可達(280.00±22.00)ug·g<'-1>FW，在不同貯藏時期、不同部位酚類物質(zhì)的種類和含量存在差異。 5．外源施用實驗表明：在100～500mg/ml濃度范圍內(nèi)，對羥基苯甲酸、阿魏酸、水楊酸和香豆素這四種酚類物質(zhì)的濃度越高，鱗莖出苗時間越早。與對照相比，低濃度(100mg／m1)均可推遲出苗日期；而在較高濃度下(200