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1、本論文報(bào)道了對(duì)東方百合進(jìn)行離體培養(yǎng)的研究結(jié)果,包括鱗片外植體的選擇與滅菌、鱗莖芽的誘導(dǎo)分化、鱗莖芽的繼代培養(yǎng)和增殖、試管鱗莖的誘導(dǎo)、試管苗的生根與移栽等,以建立較完善的東方百合組織培養(yǎng)技術(shù)體系。主要結(jié)果如下: 1、東方百合外層、中層鱗片較適宜的滅菌處理為:10%NaClO 10min+0.1%HgCl2 25min;內(nèi)層鱗片較適宜的滅菌處理為:10%NaClO 10min+0.1%HgCl2 10min。 2、東方百合適
2、宜的鱗片誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基為:MS+6-BA 1.0mg/L+2,4-D 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L。不同品種鱗片的芽誘導(dǎo)分化能力不同:索邦鱗莖芽誘導(dǎo)率71.45%,平均生成鱗莖芽數(shù)3.95;元帥鱗莖芽誘導(dǎo)率66.06%,平均生成鱗莖芽數(shù)3.48;西伯利亞鱗莖芽誘導(dǎo)率56.67%,平均生成鱗莖芽數(shù)2.09。同一品種不同部位的鱗片誘導(dǎo)能力也有差異,內(nèi)層低于外層和中層。 3、三種基本培養(yǎng)基對(duì)東方百合鱗莖芽的增殖效應(yīng):MS>M
3、iller>White。在這三類(lèi)培養(yǎng)基中,索邦品種芽增殖倍數(shù)依次為:4.69、1.83、1.23;西伯利亞品種芽增殖倍數(shù)依次為:3.70、1.67、0.83;元帥品種芽增殖倍數(shù)依次為3.86、1.85、1.11。 4、一定濃度范圍內(nèi)的6-BA、KT和NAA、IBA間的配組對(duì)東方百合鱗莖芽的增殖起促進(jìn)作用。鱗莖組培芽增殖的適宜培養(yǎng)基為:MS+1.0-2.0mg/L6-BA+1.0mg/LKT+0.2mg/LNAA,不同品種對(duì)最佳激
4、素組合濃度略有不同。3個(gè)品種間的芽增殖結(jié)果比較,以索邦最優(yōu)。 5、不同細(xì)胞分裂素種類(lèi)對(duì)芽增殖和壯苗的效果不同。6-BA在芽增殖方面優(yōu)于同濃度水平的KT;KT在壯苗方面優(yōu)于同濃度水平的6-BA。 6、東方百合增殖培養(yǎng)的適宜代數(shù)是3~5代。芽增殖倍數(shù)比較:索邦>元帥>西伯利亞。 7、適當(dāng)提高蔗糖濃度能促進(jìn)東方百合三個(gè)品種試管結(jié)鱗莖。當(dāng)蔗糖濃度為80g/L時(shí),東方百合三個(gè)品種的結(jié)鱗莖率、鱗莖直徑和鱗莖鮮重均達(dá)到最大值。
5、索邦結(jié)鱗莖率為100%,鱗莖直徑1.768cm,鱗莖鮮重8.55g;西伯利亞結(jié)鱗莖率為100%,鱗莖直徑.1.709cm,鱗莖鮮重8.01g;元帥結(jié)鱗莖率為100%,鱗莖直徑1.744cm,鱗莖鮮重8.82g。但當(dāng)蔗糖至高濃度(>100g/L)則對(duì)試管結(jié)鱗莖不利,所形成的鱗莖變小。 8、培養(yǎng)基中附加香豆素對(duì)試管結(jié)鱗莖有利。東方百合三個(gè)品種索邦、西伯利亞和元帥的香豆素適宜濃度分別為:12mg/L、6mg/L和9mg/L。
6、9、多效唑(MET)的適宜濃度對(duì)東方百合三個(gè)品種試管結(jié)鱗莖有促進(jìn)作用。索邦的MET適宜濃度為3mg/L;西伯利亞和元帥的MET適宜濃度為2mg/L。 10、基本培養(yǎng)基1/2MS比MS更利于東方百合的生根。三個(gè)品種的苗素質(zhì)和根素質(zhì)比較:索邦>西伯利亞>元帥。 11、生長(zhǎng)激素NAA、IBA濃度均以0.9mg/L時(shí),適宜東方百合三個(gè)品種的生根培養(yǎng)。兩種激素比較,NAA的生根效應(yīng)優(yōu)于IBA。 12、生根粉ABT有良好的發(fā)
7、根作用。當(dāng)ABT濃度為4.0mg/L時(shí),索邦根數(shù)最多,為17.95條;當(dāng)ABT濃度為3.0mg/L時(shí),元帥根數(shù)最多,為13.45條;當(dāng)ABT濃度為2.0mg/L時(shí),西伯利亞根數(shù)最多,為12.67條。 13、適宜濃度(0.6-0.9mg/L)的多效唑能使苗健壯,苗移栽后成活率也較高。MET濃度過(guò)高(>1.2mg/L)會(huì)抑制試管苗的生長(zhǎng)。 14、不同種類(lèi)基質(zhì)對(duì)試管苗移栽生長(zhǎng)影響不同。單一基質(zhì)比較:泥炭>菜園土>細(xì)沙>黃泥,索
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