東方百合離體誘變和耐鹽突變體的篩選.pdf

1、本試驗采用60Coγ射線急性輻照，X射線慢性輻照，X射線急性輻照三種方法對東方百合索邦（Sorbonne）組織培養(yǎng)形成的不定芽進行輻照處理，研究了不同輻照方法的輻射生物學(xué)效應(yīng)。并將輻射后的百合不定芽采用逐步提高鹽濃度的方法進行耐鹽突變體的篩選，獲得了百合耐鹽突變體，對耐鹽突變體進行同工酶分析，測定了鹽環(huán)境中耐鹽突變體生理指標(biāo)的動態(tài)變化，結(jié)果表明： 1．60Coγ射線輻照對東方百合不定芽的生長有抑制作用，60COγ射線處理東方百合

2、索邦（Sorbonne）組培不定芽的適宜輻照劑量在2．0～4．0Gy之間，其半致死劑量為6．07Gy，半致矮劑量為5．21Gy。高劑量處理（≥4．0Gy） POD同工酶酶譜與對照差異大。 2．東方百合不定芽受X射線慢性輻照3個月后，輻照處理對東方百合不定芽的生長有顯著性抑制作用，對不定芽增殖影響不明顯，隨著輻照劑量的增大，不定芽死亡率增大。不定芽POD同工酶發(fā)生了顯著的改變，活性增強，條帶數(shù)增多，X射線慢性輻照處理對東方百合不定

3、芽誘變作用明顯。 3．用X射線對東方百合組培不定芽進行了急性輻照處理，結(jié)果顯示X射線急性輻照劑量偏低，輻照效應(yīng)表現(xiàn)為刺激作用，促進了東方百合不定芽生長。 4．試驗以百合健壯不定芽進行了確定百合耐鹽臨界濃度的預(yù)試驗，根據(jù)植株的受害情況確定了東方百合耐NaCl臨界濃度為0．75％。將百合輻照材料采取逐步提高鹽濃度的方法進行耐鹽突變體的篩選，共篩選到耐0．75％NaCl的突變體（T1）329個、耐1．0％NaCl的突變體（T2

4、）139個、耐1．25％NaCl的突變體（T3）58個。試驗發(fā)現(xiàn)三種輻照方法的耐鹽誘變效果為γ射線急性輻照>X射線慢性輻照>X射線急性輻照。耐鹽突變體同工酶分析發(fā)現(xiàn)突變體比對照多出了一些特異性同工酶帶。耐鹽突變體在鹽環(huán)境中通過調(diào)節(jié)POD酶和SOD酶酶活性，降低了鹽對細胞質(zhì)膜的傷害，從而表現(xiàn)為對鹽環(huán)境的適應(yīng)性。 5．本研究篩選到能耐1．25％NaCl的東方百合耐鹽突變體，遠高于東方百合原品種的耐鹽臨界濃度（0．75％），耐鹽性高。