毛百合組織培養(yǎng)與試管鱗莖膨大的研究.pdf

1、本試驗(yàn)以毛百合鱗片、無菌苗葉片為外植體，建立高效組織培養(yǎng)再生體系，為毛百合的育種、遺傳轉(zhuǎn)化、園林應(yīng)用及生產(chǎn)等奠定理論基礎(chǔ)。探討了不同濃度的活性炭(AC)、蔗糖、大量元素、NAA、IBA、多效唑(PP333)、水楊酸(SA)、以及培養(yǎng)基狀態(tài)對鱗莖形成及膨大的影響，以期為毛百合引種馴化及試管微鱗莖的工廠化生產(chǎn)提供理論依據(jù)及關(guān)鍵技術(shù)。
　　1.以毛百合鱗片為外植體建立了組培快繁再生體系
　　試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)消毒處理采用75％酒精和2％次氯

2、酸鈉滅菌12min最佳;中層鱗片為組織培養(yǎng)的最佳外植體，鱗片不同部位的誘導(dǎo)及分化能力由強(qiáng)到弱依次基部、中部、頂部;單因子試驗(yàn)表明，6-BA與不定芽誘導(dǎo)和愈傷的形成有直接關(guān)系，鱗片誘導(dǎo)不定芽的最佳培養(yǎng)基MS+6-BA2.0mg/L分化率86.7％，分化系數(shù)4.70;愈傷誘導(dǎo)及分化最佳培養(yǎng)基MS+6-BA（1.0-2.0mg/L），誘導(dǎo)率83.3％，分化系數(shù)6.25;2，4-D（小于2.0mg/L）促進(jìn)愈傷的形成及分化，但對不定芽的分化無影

3、響;雙因子試驗(yàn)表明，愈傷誘導(dǎo)及分化的最佳培養(yǎng)基是MS+6-BA0.5mg/L+2，4-D1.0mg/L;誘導(dǎo)率90％，分化系數(shù)7.44;誘導(dǎo)不定芽的最佳培養(yǎng)基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L，分化率86.7％，分化系數(shù)5.69;不定芽增殖的最佳培養(yǎng)基MS+BA1.0mg/L+NAA0.1 mg/L，增殖系數(shù)7.8。最佳生根培養(yǎng)基MS+AC0.5mg/L，生根率100％，移栽到珍珠巖基質(zhì)中，成活率達(dá)85％。
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4、.以無菌苗葉片為外植體建立再生體系
　　試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)葉片的誘導(dǎo)分化存在著顯著的位置效益，葉片的誘導(dǎo)分化能力由強(qiáng)到弱依次是基部、中部、頂部;不定芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基MS+NAA0.3mg/L+6-BA2.0mg/L，分化率86.7％，分化系數(shù)4.31;不定芽增殖最佳培養(yǎng)基MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L，增殖系數(shù)4.93，生長良好;最佳生根培養(yǎng)基1/2MS+NAA1.0mg/L和1/2MS+IBA1.0mg/L，生根率均達(dá)

5、100％。移栽幼苗成活率達(dá)82％以上。
　　3.鱗莖膨大試驗(yàn)研究
　　試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)當(dāng)AC濃度為1.0g/L時，鱗莖直徑增大2.50倍，鮮重828.2mg，結(jié)鱗莖率100％，新增鱗莖4.40個;當(dāng)NAA濃度為1.0mg/L時，鱗莖直徑增大2.26倍，鮮重658.4mg，新增鱗莖2.60個;當(dāng)IBA濃度在1.0-2.0mg/L范圍時，結(jié)鱗莖率均100％，鱗莖直徑均增大2.04倍，當(dāng)IBA濃度為1.0mg/L時，新增鱗莖數(shù)2.57個，

6、當(dāng)IBA濃度為2.0 mg/L時，更有利于鱗莖的膨大，鮮重675.8mg;2MS對鱗莖的形成和膨大的效果最好，鱗莖直徑增大2.37倍，鮮重696.5mg，結(jié)鱗莖率為100％，新增鱗莖3.60個;當(dāng)蔗糖為90 g/L時，鱗莖直徑增大2.05倍，鮮重628.3mg，結(jié)鱗莖率100％，新增鱗莖1.37個;當(dāng)PP333濃度為10mg/L時，鱗莖直增大2.20倍，鱗莖鮮重625.4mg，結(jié)鱗莖率100％。水楊酸有利于提高鱗莖的誘導(dǎo)率，但不利于鱗莖