口腔扁平苔蘚發(fā)病及其惡變機(jī)理的探討.pdf

1、目的: 口腔扁平苔蘚(OLP)，是一種較常見的口腔粘膜慢性非特異性炎癥，被認(rèn)為是細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病，具有癌變潛在性，WHO將OLP確定為癌前狀態(tài)。 本課題第一部分：在河北省內(nèi)，通過多階段分層等容量隨機(jī)抽樣的方法，調(diào)查OLP在河北省的發(fā)病特征、人群和空間分布狀況，并對(duì)上述諸多因素進(jìn)行流行病學(xué)研究，為我國人群中OLP的診斷、治療提供流行病學(xué)資料。本課題第二部分：收集五年期間在河北醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)院就診的OLP患者101例的臨床病

2、理資料，采用免疫組織化學(xué)方法，針對(duì)OLP的相關(guān)癌變因素：Ki-67和Cox-2，檢測(cè)其在101例OLP患者病變中的表達(dá)，并以正?？谇徽衬ず涂谇击[狀細(xì)胞癌作為比較，探討Ki-67、Cox-2表達(dá)與口腔OLP潛在惡性的關(guān)系。本課題第三部分：采用RT-PCR的方法，檢測(cè)60例OLP患者病變及病變旁組織和相鄰正?？谇徽衬ぶ型蛔冃蚿53基因的mRNA表達(dá)水平，并與口腔鱗狀細(xì)胞癌比較，探討OLP癌變潛在危險(xiǎn)性和癌變機(jī)理，為OLP的早期診斷、治療以及

3、癌變的預(yù)防提供可靠依據(jù)。 材料與方法 1.河北省口腔扁平苔蘚的流行病學(xué)調(diào)查: 根據(jù)“第三次全國口腔健康流行病學(xué)調(diào)查方案”，參照WHO《口腔健康調(diào)查基本方法》(第四版)，采用多階段分層等容量隨機(jī)抽樣的方法，通過樣本估計(jì)總體。在河北省三市、三縣，隨機(jī)抽樣共選取36個(gè)調(diào)查點(diǎn)，2個(gè)年齡組各調(diào)查742人，男女比為1:1，共調(diào)查1548人。OLP診斷標(biāo)準(zhǔn)：采用全國牙防組制定的《第三次全國口腔健康流行病學(xué)調(diào)查方案》中對(duì)OLP的診斷標(biāo)準(zhǔn)

4、。全部調(diào)查資料使用SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 2.口腔扁平苔蘚中Ki-67、COx-2表達(dá)與其潛在惡性的關(guān)系: 收集口腔扁平苔蘚101例，另取口腔癌手術(shù)標(biāo)本10例，口腔正常頰粘膜標(biāo)本10例作為對(duì)照。使用免疫組化(SP法)方法檢測(cè)Ki-67、Cox-2蛋白的表達(dá)情況。采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行單因素方差分析。 3.口腔扁平苔蘚中突變型p53基因mRNA表達(dá)的檢測(cè): 60例口腔扁平苔蘚和30例頰癌均經(jīng)病理

5、確診，20例正?？谇活a粘膜來自外傷創(chuàng)面周圍的組織，作為正常對(duì)照組標(biāo)本。采用一步法RT-PCR檢測(cè)突變型p53基因mRNA水平的表達(dá)。所有數(shù)據(jù)采用SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用X2檢驗(yàn)。 4 口腔扁平苔蘚及其鄰近組織中突變型p53基因mRNA的表達(dá): 30名患者經(jīng)病理診斷確診為口腔扁平苔蘚。每名患者采集病變區(qū)、病變旁、正常組織區(qū)三個(gè)部位標(biāo)本各一，共90個(gè)標(biāo)本。病變旁組織與病變組織距離≥5mm，正常組織與病變旁組織距離≥1

6、cm。所有標(biāo)本的采集均在患者知情并同意的情況下進(jìn)行。采用一步法RT-PCR檢測(cè)突變型p53基因mRNA水平的表達(dá)。所有數(shù)據(jù)采用SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用χ2檢驗(yàn)。 結(jié)果: 1.在本次流行病學(xué)調(diào)查中，河北省被調(diào)查人群中口腔扁平苔蘚的患病率為0.82％，略高于我國“口腔白斑、扁平苔蘚兩病防治協(xié)作組”的調(diào)查結(jié)果，測(cè)算河北省口腔扁平苔蘚患病率的95％可信區(qū)間為0.38％～1.26％。 2.流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯

7、示：河北省各種口腔粘膜病構(gòu)成比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，口腔扁平苔蘚是目前口腔粘膜病中除復(fù)發(fā)性口瘡?fù)獾淖疃嘁姷目谇徽衬げ　?3.口腔扁平苔蘚好發(fā)于頰部，其患病有隨著年齡增加而增加的趨勢(shì)，無城鄉(xiāng)差異。 4 臨床病理資料分析: 101例口腔扁平苔蘚中，男性39例，女性62例，男：女之比為1:1.6，女性多于男性。就診年齡最小者21歲，最長(zhǎng)者78歲，平均年齡為48.8歲。發(fā)病部位最常見為頰部81例；其次為舌部11例；其它牙齦5例；唇部

8、4例。 5 口腔扁平苔蘚的病理學(xué)改變: 101例口腔扁平苔蘚的組織病理學(xué)改變?yōu)?，上皮增生和或萎縮，基底細(xì)胞灶狀或片狀液化消失，上皮下淋巴細(xì)胞呈帶狀浸潤(rùn)。其中表現(xiàn)為上皮增生者48例；上皮萎縮者22例；上皮增生與萎縮同時(shí)出現(xiàn)者23例。15例伴有上皮下皰；19例伴上皮糜爛和漬瘍。7例出現(xiàn)上皮輕度不典型增生；1例出現(xiàn)上皮癌變，OLP癌變率為0.9％(1/101)，癌前病變發(fā)病率為6.9％(7/101)?？谇击[狀細(xì)胞的病理組織學(xué)表現(xiàn)為，異

9、型性的腫瘤細(xì)胞呈多邊形或圓形，排列成巢狀，可見細(xì)胞間橋，腫瘤細(xì)胞有角化傾向，形成癌珠。 6 Ki-67在口腔扁平苔蘚中的表達(dá): 10例正常口腔粘膜均表達(dá)Ki-67，陽性細(xì)胞散在于基底細(xì)胞中，其陽性細(xì)胞比例為15.2％。在101例口腔扁平苔蘚中，93例表達(dá)Ki-67，陽性細(xì)胞位于增生上皮或萎縮上皮的基底細(xì)胞和基底旁細(xì)胞中，其陽性細(xì)胞比例為37.1％。扁平苔蘚伴上皮輕度不典型增生的病例中，陽性細(xì)胞比例為47.0％；扁平苔蘚伴上皮癌變

10、的病例，其陽性細(xì)胞比例為61.0％。10例口腔鱗狀細(xì)胞癌全部表達(dá)Ki-67，陽性細(xì)胞隨著腫瘤異型性基底細(xì)胞和基底樣細(xì)胞增多而明顯增多，其陽性細(xì)胞比例為62.5％。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明，扁平苔蘚陽性率高于正?？谇徽衬?，低于口腔鱗狀細(xì)胞癌，差別均有顯著性(P<0.05)。單純扁平苔蘚(36.1％)與扁平苔蘚伴上皮輕度不典型增生(47.0％)之間差別無顯著性(P>0.05)；而與扁平苔蘚伴上皮癌變(61.0％)之間差別有顯著性(P<0.05)。

11、 7 Cox-2在口腔扁平苔蘚中的表達(dá): 10例正常粘膜均不表達(dá)Cox-2。101例扁平苔蘚中36例表達(dá)Cox-2，陽性率為35.6％，病變表現(xiàn)為上皮棘層細(xì)胞、粒層細(xì)胞和表層細(xì)胞呈陽性表達(dá)，基底細(xì)胞呈陰性表達(dá)。扁平苔蘚伴上皮輕度不典型增生的病變中，陽性的棘層細(xì)胞增多，并具有異型性。扁平苔蘚伴上皮癌變的病變中，陽性的腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)至腫瘤間質(zhì)。在陽性的36例口腔扁平苔蘚中，組織病理學(xué)改變?yōu)樯掀ぴ錾?6例陽性；上皮萎縮者9例陽性：上皮增生

12、與萎縮相間者4例；上皮不典型增生陽性者6例；上皮癌變陽性者1例。10例口腔鱗狀細(xì)胞癌中2例表達(dá)Cox-2，陽性率為20.0％。陽性的腫瘤細(xì)胞異型性明顯，浸潤(rùn)性生長(zhǎng)。Cox-2在正?？谇徽衬?0％)、扁平苔蘚(35.6％)及口腔鱗狀細(xì)胞癌(20.0％)三者之間差別有顯著性(P<0.05)；口腔粘膜與扁平苔蘚之間以及口腔粘膜與口腔鱗狀細(xì)胞癌之間差別均有顯著性(P<0.05)。扁平苔蘚(35.6％)及口腔鱗狀細(xì)胞癌(20.0％)之間差別無顯著

13、性(P>0.05)。 8 口腔扁平苔蘚突變型p53基因mRNA水平表達(dá)的結(jié)果顯示，60例口腔扁平苔蘚中表達(dá)陽性者13例；陽性率為21.67％(13/60)。30例口腔頰癌中表達(dá)陽性者16例；陽性率為53.3％(16/30)。20例口腔正常粘膜p53基因mRNA表達(dá)陽性者1例；陽性率為5％(1/20)?？谇槐馄教μ\組與口腔癌中p53基因mRNA陽性率比較，差異有顯著性(P<0.017)?？谇槐馄教μ\組與口腔正常粘膜組的p53基因m

14、RNA陽性率比較，差異無顯著性(P>0.05)?？谇活a癌與正常口腔粘膜p53基因mRNA陽性率比較，差異有顯著性(P<0.017)。 9 RT-PCR檢測(cè)突變型p53基因在扁平苔蘚及其鄰近組織中的表達(dá)，結(jié)果顯示，30例口腔扁平苔蘚患者中，每例包括扁平苔蘚病變組織、病變旁組織及正常組織，共90個(gè)標(biāo)本，其中p53基因mRNA表達(dá)均為陽性者3例；占全部患者的10％(3/30)。扁平苔蘚病變旁組織為陽性，病變組織和正常組織為陰性者3例；

15、占全部患者的10％(3/30)。扁平苔蘚病變組織為陽性，病變旁組織及正常組織為陰性者1例；占全部患者的3.33％(1/30)。扁平苔蘚病變和病變旁組織均為陽性，正常組織陰性者1例；占全部患者的3.33％(1/30)。 結(jié)論: 1.河北省被調(diào)查人群中OLP患病率為0.82％，河北省OLP患病率的95％可信區(qū)間為0.38％～1.26％。 2.本研究流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示：河北省各種口腔粘膜病構(gòu)成比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，OL

16、P是口腔粘膜病中除復(fù)發(fā)性口瘡?fù)獾淖疃嘁姷目谇徽衬げ　?3.本研究臨床病理分析顯示：OLP癌變率為0.9％，癌前病變發(fā)病率為6.9％；說明OLP具有潛在癌變性。 4 Ki-67蛋白表達(dá)陽性率從正常口腔粘膜到OLP和口腔癌依次增加，三者之間差別有顯著性(P<0.05)，表明上皮細(xì)胞增殖能力的異常提高和細(xì)胞分化的異型，是OLP癌變的機(jī)理。 5 Ki-67在單純OLP與OLP伴上皮輕度不典型增生之間，差異無顯著性，在單純

17、OLP與OLP伴上皮癌變之間差異有顯著性(P<0.05)；表明OLP上皮增生以及惡性轉(zhuǎn)變，存在由量變到質(zhì)變的飛躍過程。 6 在OLP伴癌前病變的早期階段，Cox-2已經(jīng)明顯增高，這對(duì)于癌的發(fā)生起到了催化和促進(jìn)作用。 7 OLP與口腔癌中p53基因mRNA表達(dá)陽性率比較，差異有顯著性(P<0.017)；OLP與口腔正常粘膜的p53基因mRNA陽性率比較，差異無顯著性(P>0.05)?？谇话┡c正?？谇徽衬53基因mRNA陽性率比較