土壤中石油烴分段測(cè)定方法及根際促生菌強(qiáng)化植物修復(fù)研究.pdf

1、在石油勘探、開(kāi)采、運(yùn)輸與加工等過(guò)程中，由于操作不慎或偶然事故使相當(dāng)量石油進(jìn)入環(huán)境，這已成了世界性的環(huán)境問(wèn)題，土壤石油污染是石油生產(chǎn)過(guò)程中造成的環(huán)境污染之一。在我國(guó)北方產(chǎn)油區(qū)原油污染面積逐年擴(kuò)大，石油污染問(wèn)題日益凸顯，土壤污染日趨嚴(yán)重，如何修復(fù)石油污染土壤成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。植物修復(fù)方法有處理成本低、不存在二次污染，綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛關(guān)注，已經(jīng)成為目前國(guó)內(nèi)外環(huán)境治理技術(shù)的研究熱點(diǎn)。本文針對(duì)石油污染土壤，開(kāi)展土壤中總石油烴的測(cè)定及植物修

2、復(fù)技術(shù)的研究，為石油污染土壤的評(píng)估和生物修復(fù)提供一些技術(shù)參考。
　　本研究的主要結(jié)果如下:
　　本文建立了一套氣相色譜-質(zhì)譜法分段檢測(cè)土壤中總石油烴的檢測(cè)方法，檢測(cè)石油污染土壤中的石油烴含量，評(píng)價(jià)修復(fù)效果。確定了石油污染土壤的前處理方法:采用索氏提取有機(jī)萃取方法提取土壤中石油烴，然后通過(guò)柱層析方法分離石油烴。確定了不同餾分的替代化合物，通過(guò)替代化合物進(jìn)行質(zhì)量控制研究，研究結(jié)果均能滿足分析中定性定量的要求，可以用來(lái)檢測(cè)石油污染

3、土壤中石油烴的含量。確定了檢測(cè)土壤中石油烴的儀器分析方法中的定量方法:采用氣相色譜法-質(zhì)譜法(GC/MS)全離子掃描模式(SCAN)，分段積分的方式計(jì)算不同餾分石油烴的量。本方法不僅能測(cè)定C8-C34所有結(jié)構(gòu)的烴類，還能確切的計(jì)算出不同餾分化合物的含量，準(zhǔn)確反映土壤的污染程度和毒性。
　　本文利用改進(jìn)的根系分泌物循環(huán)收集裝置準(zhǔn)確收集和研究根系分泌物，通過(guò)GC-MS鑒定，檢測(cè)到高羊茅根系分泌物中主要物質(zhì)有苯酚、苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸、

4、棕櫚酸、硬脂酸等5種組分。研究4種有機(jī)酸對(duì)在植物修復(fù)中具有促生能力的Klebsiella sp.D5A菌株的化感作用。這四種有機(jī)酸對(duì)D5A趨化作用結(jié)果表明:D5A菌株在有機(jī)酸濃度為10-40μM的條件下趨化性指數(shù)均大于2，趨化效果顯著，D5A菌對(duì)這四種有機(jī)酸均有積極依賴的趨化行為，其中棕櫚酸的趨化性效果最好;在有機(jī)酸為30μM時(shí)D5A菌的趨化性指數(shù)最大。研究以上四種酸對(duì)菌群的遷移性結(jié)果表明:對(duì)羥基苯甲酸、硬脂酸對(duì)菌群沒(méi)有明顯的誘導(dǎo)效果，

5、苯甲酸及棕櫚酸對(duì)菌群則產(chǎn)生明顯的遷移誘導(dǎo)效果，苯甲酸、棕櫚酸對(duì)應(yīng)的菌圈的直徑分別為對(duì)照的1.58倍和1.98倍。
　　本文還研究了實(shí)驗(yàn)室篩選到的植物促生菌D5A對(duì)鹽分和酸堿逆境的適應(yīng)性。研究結(jié)果顯示:菌株D5A在pH范圍為4-10的四種培養(yǎng)基中的均能正常生長(zhǎng)，說(shuō)明菌株D5A具有較強(qiáng)的酸堿耐性。D5A的生長(zhǎng)隨鹽含量的增加逐漸受到抑制，但在9％鹽濃度的環(huán)境下，菌株D5A的OD值仍為1.2，且能產(chǎn)生一定量的IAA，表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐鹽性。在

6、實(shí)驗(yàn)室條件下設(shè)計(jì)了試管瓊脂試驗(yàn)，結(jié)果顯示:高羊茅根系總長(zhǎng)度、根表面積、根尖數(shù)和根平均直徑，經(jīng)接種D5A菌處理較對(duì)照分別增加了104.6％、29.1％、146.9％，根平均直徑降低了40.7％。接種S-B菌的處理較對(duì)照分別增加了80.1％、0.5％、73.1％，根平均直徑降低了40.0％。菌株D5A和S-B在不同程度上都促進(jìn)了高羊茅根系的發(fā)育，對(duì)高羊茅在鹽脅迫條件下的生長(zhǎng)具有明顯的促進(jìn)作用，D5A促進(jìn)效果更為顯著。
　　通過(guò)盆栽試驗(yàn)