腦內(nèi)注射Aβ-,1-42-和Thiorphan建立恒河猴AD模型.pdf

1、目的：阿爾茨海默(Alzheimerdisease,AD)病患者出現(xiàn)行為學(xué)異常，Aβ沉淀，神經(jīng)元丟失，膽堿能系統(tǒng)功能障礙，小膠質(zhì)和星形膠質(zhì)細(xì)胞增生的炎癥反應(yīng)等病理改變。臨床試驗(yàn)研究證實(shí)雌激素有助于改善AD患者的癥狀，雌激素作用大部分是通過雌激素受體介導(dǎo)的。本次實(shí)驗(yàn)?zāi)康奶接懤夏旰愫雍锎竽X內(nèi)注射Aβ1-42和Thiorphan能否出現(xiàn)類似于AD患者行為學(xué)障礙，Aβ沉淀，神經(jīng)元消失以及膽堿能系統(tǒng)乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(ChAT)，雌激素受體(ER)表

2、達(dá)的情況。從而評(píng)估腦內(nèi)注射Aβ1-42和Thiorphan建立的恒河猴AD模型。 方法：1實(shí)驗(yàn)分組[1]對(duì)照組：1號(hào)猴，除接受手術(shù)開顱注射生理鹽水外，沒有注射任何藥物，其它干預(yù)措施與實(shí)驗(yàn)組相同。 [2]實(shí)驗(yàn)組：2、3、4號(hào)猴子，開顱和注射Aβ1-42和Thiorphan。 2無菌條件下采取開顱手術(shù)，注射Aβ1-42和Thiorphan到大腦頂葉皮質(zhì)、顳葉皮質(zhì)和基底核，并且用為滲透泵長(zhǎng)達(dá)28天的時(shí)間灌注Thiorp

3、han到基底核。 3在Wisconsin訓(xùn)練猴籠(WisconsinGeneralTestingApparatus)用延遲訓(xùn)練的方法測(cè)試猴子給藥前后的行為學(xué)變化。 4大腦病理學(xué)觀察 [1]HE染色觀察大腦病理改變。 [2]免疫組化的方法檢測(cè)猴子腦內(nèi)Aβ1-42、乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(CHAT)、雌激素受體(ER)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)陽性神經(jīng)元的變化。 結(jié)果：1、實(shí)驗(yàn)前后猴子的行為學(xué)結(jié)果沒有發(fā)生

4、改變。 2、HE染色顯微鏡下給藥組注射位點(diǎn)附近組織結(jié)構(gòu)混亂，海馬和基底核局部神經(jīng)元丟失，神經(jīng)元萎縮，噬神經(jīng)元現(xiàn)象，小膠質(zhì)細(xì)胞大量激活。 3、實(shí)驗(yàn)組Aβ1-42免疫組化海馬和基底核等出現(xiàn)陽性神經(jīng)元。 4、實(shí)驗(yàn)組乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(CHAT)陽性神經(jīng)元數(shù)量下降。 5、實(shí)驗(yàn)組雌激素受體(ER)陽性神經(jīng)元減少。 6、實(shí)驗(yàn)組膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)免疫組化著色濃度和密度增強(qiáng)。 7、側(cè)腦室壁的室管膜上