聚乳酸-甲殼素接骨板的體外細(xì)胞毒性研究.pdf

1、研究目的:通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),采用不同的細(xì)胞毒性試驗(yàn)方法,檢測(cè)聚乳酸-甲殼素接骨板接觸細(xì)胞后細(xì)胞發(fā)生的特異性生物學(xué)變化,并預(yù)測(cè)最終體內(nèi)應(yīng)用時(shí)的組織細(xì)胞反應(yīng),在短期內(nèi)較經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便地檢測(cè)出聚乳酸-甲殼素接骨板的細(xì)胞毒性,為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行與否提供先決條件,并為今后聚乳酸-甲殼素接骨板的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).研究方法:1.分別用聚乳酸-甲殼素接骨板浸提液(測(cè)試樣品,實(shí)驗(yàn)組)、聚乳酸接骨板浸提液(參照樣品組)和RPMI1640培養(yǎng)基(

2、空白對(duì)照組)培養(yǎng)L929細(xì)胞,通過(guò)細(xì)胞增殖度法(RGR法)、細(xì)胞生長(zhǎng)抑制法(MTT法)、流式細(xì)胞儀法(FCM法),觀察其生長(zhǎng)、增殖及形態(tài)學(xué)變化,對(duì)聚乳酸-甲殼素接骨板的細(xì)胞毒性進(jìn)行評(píng)價(jià);2.將L929細(xì)胞直接接種于聚乳酸-甲殼素接骨板表面,進(jìn)行直接接觸法實(shí)驗(yàn),通過(guò)光鏡、掃描電鏡及透射電鏡觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖及形態(tài)學(xué)變化,進(jìn)一步對(duì)聚乳酸-甲殼素接骨板的細(xì)胞毒性進(jìn)行評(píng)價(jià).3.用SD大鼠成骨細(xì)胞進(jìn)行MTT法和直接接觸法實(shí)驗(yàn),觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)、增

3、殖及形態(tài)學(xué)變化,評(píng)價(jià)聚乳酸-甲殼素接骨板的骨細(xì)胞相容性.4.統(tǒng)計(jì)方法:采用SPSS10.0 for Windows統(tǒng)計(jì)軟件,將所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理.結(jié)論:1.聚乳酸-甲殼素接骨板不影響L929細(xì)胞的粘附、生長(zhǎng)及增殖,無(wú)明顯的細(xì)胞毒性.2.聚乳酸-甲殼素接骨板對(duì)SD大鼠成骨細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖無(wú)明顯影響,具有良好的骨細(xì)胞相容性.3.聚乳酸-甲殼素接骨板和聚乳酸接骨板的體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果無(wú)顯著性差異.4.聚乳酸-甲殼素接骨板具有良好的生