LY-EC誘導(dǎo)肝細(xì)胞毒性的體外試驗(yàn)研究.pdf

1、目的：在體外試驗(yàn)系統(tǒng)，探討瀏陽霉素乳劑(Liuyangmycinemulsifiable concentrate，LY-EC)對(duì)L-02肝細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)及線粒體能量代謝的影響，為進(jìn)一步研究瀏陽霉素肝損害的毒性機(jī)制奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法：用L-02肝細(xì)胞為受試細(xì)胞，通過MTT試驗(yàn)檢測(cè)LY-EC對(duì)L-02肝細(xì)胞存活率的影響，在>60﹪細(xì)胞存活率的濃度下設(shè)置6個(gè)試驗(yàn)組即100mg/L、25mg/L、6.25mg/L、1.56mg/L、0

2、.39mg/L LY-EC處理組和1個(gè)對(duì)照組，LY-EC處理細(xì)胞時(shí)間為12h。用化學(xué)比色法測(cè)定谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、肝細(xì)胞線粒體琥珀酸脫氫(SDH)、細(xì)胞膜ATP酶、谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶(GST)活性和線粒體膜通透性轉(zhuǎn)運(yùn)孔(PTP)開放度；用高效液相色譜法檢測(cè)不同濃度LY-EC對(duì)肝細(xì)胞中腺苷酸(ATP，ADP，AMP)含量的影響，并分析ATP/ADP比值以及負(fù)荷能量(EC)的變化；電鏡觀察高、

3、中濃度LY-EC對(duì)線粒體超微結(jié)構(gòu)的影響。 結(jié)果：在100mg/L-0.39mg/L處理濃度范圍，LY-EC對(duì)L-02肝細(xì)胞具有明顯細(xì)胞毒性，其細(xì)胞存活指數(shù)與LY-EC處理濃度呈負(fù)明顯相關(guān)(r=-0.939)。LY-EC處理的肝細(xì)胞與對(duì)照組比較，其細(xì)胞SOD、SDH、ATP酶與GST活性顯著降低(P<0.05)，線粒體PTP開放度與MDA含量明顯增加(P<0.05)，并觀察到明顯的濃度．效應(yīng)關(guān)系。染毒組肝細(xì)胞內(nèi)GSH、總腺苷酸含量