刺五加苷對(duì)衰老模型大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙及海馬相關(guān)酶影響的研究.pdf

1、目的：本研究擬觀察： 1.刺五加苷(eleutheroside/ETS)對(duì)喹啉酸致衰老模型大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的影2.ETS對(duì)喹啉酸損傷衰老模型大鼠海馬神經(jīng)元的保護(hù)作用； 3.探究ETS對(duì)衰老模型大鼠血及海馬AChE、NOS、SOD和Na+-K+-ATP酶、MAO活性的影響； 4.探討ETS對(duì)衰老模型大鼠學(xué)習(xí)記憶影響的藥理作用機(jī)制。 方法： 1.ETS提取：用大孔吸附樹脂(macroporous ad

2、sorptive resins，MAR)提取刺五加苷總提取物。 2.動(dòng)物分組與模型制備：取經(jīng)過行為學(xué)實(shí)驗(yàn)篩選合格的10月齡雄性Wister大鼠65只，隨機(jī)分為模型組(model group，MG)、低劑量治療組(low dose group，LDG，50mg·kg-1)、中劑量治療組(middle dose group，MDG，100mg·kg-1)、高劑量治療組(high dose group，HDG，200mg·kg-1)、

3、石杉?jí)A甲陽性組(Huperzine A group，Hup-AG，0.3mg·kg-1)、假手術(shù)組(Sham operated group，SOG)。各組水合氯醛(chloralhydrate，CH，400mg·kg-1)腹腔麻醉，立體定位后，雙側(cè)海馬CA1區(qū)注射藥物，MG、LDG、MDG、HDG、Hup-AG注射磷酸鹽緩沖溶液(phosphate buffered solution，PBS)溶解的喹啉酸2μL(quinaldinic

4、acid，QA)，制備衰老模型大鼠模型，SOG注入等體積的PBS緩沖液。 3.給藥：模型制各術(shù)后1 w開始灌胃給藥(ig)4w。MG和SOGig等容量NS，LDG、MDG和HDG分別ETS 50、100、200mg·kg-1，ig。Hup-AGig等容量石杉?jí)A甲(huperzine A，Hup-A，0.3mg·kg-1)混液。 4.觀察與檢測：模型制備術(shù)1周給藥前和給藥4 W后分別兩次水迷宮實(shí)驗(yàn)，測定學(xué)習(xí)記憶能力，并術(shù)后1 w給

5、藥前斷尾取血以及給藥4 w后斷頭取血取腦，間接測定血液與海馬勻漿(hippocampus homogenate，HPHG)ACh、Ch及CHE、NOS、SOD、Na+-K+-ATP酶、MAO活性；Nissl染色觀察海馬神經(jīng)元變化。 結(jié)果： 1.跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)(step down test，SDT)結(jié)果表明：MDG、HDG首次跳上平臺(tái)潛伏期(first latence of jumping up to the platform，

6、FLP)以及出現(xiàn)的錯(cuò)誤次數(shù)(errors，ERR)顯著少于SOG、MG(P＜0.05或P＜0.01)；Morris水迷宮法實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：大鼠尋找平臺(tái)潛伏期(place navigation，PN)和錯(cuò)誤次數(shù)(errors，ERR)，HDG，MDG，LDG顯著少于MG(P＜0.05或P＜0.01)，均呈劑量依賴趨勢。 2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：ETS治療組海馬勻漿CHE活性與MG無顯著性差異(P＞0.05)，而ACh含量顯著高于Hup-A

7、(P＜0.05或P＜0.01)，Ch含量遠(yuǎn)低于Hup-A(P＜0.01)，ACh/Ch比值是Hup-AG的2.47倍，MG的7.76倍，SOG的1.5倍，且明顯的呈劑量依賴趨勢。 3.研究結(jié)果表明：ETS各組海馬勻漿的NOS活性顯著弱于MG組(P＜0.01)，與SOG相當(dāng)(P＞0.05)，Na+-K+-ATP酶與SOD活性明顯強(qiáng)于MG(P＜0.05或P＜0.01)，均呈現(xiàn)明顯的劑量遞增趨勢。而HDG海馬勻漿MAO的活性顯著弱于M

8、G(P＜0.05或P＜0.01)。 4.形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果表明：HDG海馬CAl區(qū)錐體細(xì)胞形態(tài)趨于正常，少見錐體細(xì)胞核固縮，排列整齊，胞漿Nissl體豐富，頂樹突整齊、密集，接近SOG：MDG錐體細(xì)胞數(shù)顯著多于MG(P＜0.01)，而HDG多于MDG(P＜0.05)，少于SOG(P＜0.01)，呈劑量依賴趨勢。結(jié)論： 研究結(jié)果表明： 1.刺五加苷總提取物ETS能明顯改善QA海馬CA1區(qū)注射衰老模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，并

9、呈明顯的劑量依賴趨勢。 2.ETS改善QA海馬CA1注射所致AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的機(jī)制可能與以下因素有關(guān)：活化海馬神經(jīng)元膽堿乙酰化酶(choline acetylase，ChAc)，加速ACh的合成，增強(qiáng)海馬膽堿能神經(jīng)功能；調(diào)節(jié)NOS活性，偶聯(lián)神經(jīng)活動(dòng)與腦血流量，導(dǎo)向突觸生長與可塑，促進(jìn)遞質(zhì)釋放；激活Na+-K+-ATP酶，促進(jìn)與學(xué)習(xí)記憶有關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)釋放，調(diào)節(jié)神經(jīng)元的興奮性，改善大腦活動(dòng)的質(zhì)和量;增強(qiáng)SOD活性，加速氧自由