硝化細(xì)菌分離和培養(yǎng)以及對(duì)人造水草預(yù)固定技術(shù)在室內(nèi)對(duì)蝦集約化養(yǎng)殖中的應(yīng)用.pdf

1、硝化細(xì)菌(Nitrifying bacteria)包括亞硝化菌(Nitrite bacteria)、硝化菌(Nitrate bacteria)兩個(gè)生理菌群，在自然界氮循環(huán)中發(fā)揮著重要功能，其生長(zhǎng)特點(diǎn)是需要表面積大的附著載體，同時(shí)需要一定的成熟期(兩周左右)。而人造水草有很大的比表面積(2000m<'2>/m<'3>)，可作為微生物良好的附著、固定載體。本試驗(yàn)通過從本土養(yǎng)殖環(huán)境中分離得到純種硝化細(xì)菌，研究人造水草固定硝化細(xì)菌的技術(shù)，將養(yǎng)殖

2、初期水體中的氨氮、亞硝酸氮控制在較低水平，為對(duì)蝦生長(zhǎng)提供良好的環(huán)境，為室內(nèi)對(duì)蝦集約化養(yǎng)殖的水質(zhì)凈化提供參考依據(jù)。 經(jīng)反復(fù)初步分離篩選，采用瓊脂平板純化分離技術(shù)從對(duì)蝦養(yǎng)殖環(huán)境中得到5株優(yōu)勢(shì)純種亞硝化菌和3株優(yōu)勢(shì)純種硝化菌，并進(jìn)行格蘭氏染色作初步觀察。分離得到幾株亞硝化菌在瓊脂平版上長(zhǎng)出的菌落大小為約0.3～0.8mm，而硝化菌菌落約0.5～1.0mm。分離得到的硝化細(xì)菌大部分呈桿狀，亞硝化菌細(xì)胞長(zhǎng)約0.5～1.0μm，而硝化菌細(xì)胞

3、長(zhǎng)約1.0～1.5μm。設(shè)計(jì)一套簡(jiǎn)易培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)分離得到的幾種硝化細(xì)菌，根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果選出其中最具優(yōu)勢(shì)的亞硝化菌和硝化菌，同時(shí)檢驗(yàn)應(yīng)用該模式進(jìn)行硝化細(xì)菌培養(yǎng)的效果。培養(yǎng)結(jié)果表明，初篩的幾株硝化細(xì)菌基本上都有較強(qiáng)的生長(zhǎng)和代謝能力。通過比較細(xì)菌生長(zhǎng)能力和硝化能力篩選出Y105和X101分別是初篩的幾株亞硝化菌和硝化菌中最具優(yōu)勢(shì)的菌株。培養(yǎng)結(jié)果也證明了所設(shè)計(jì)的簡(jiǎn)易培養(yǎng)模式是簡(jiǎn)單有效的。亞硝化菌富集培養(yǎng)時(shí)間為13～19d，硝化菌為6～12d左右，

4、這期間可以不需要補(bǔ)加培養(yǎng)基，也不需要調(diào)整pH值，只要保證適宜的溫度和溶解氧，就可以得到較高密度(約10<'6>～10<'8>cell/ml)的亞硝化菌和硝化菌。結(jié)果說明從養(yǎng)殖環(huán)境中可以分離得到高效硝化細(xì)菌。 研究了在人造水草上進(jìn)行硝化細(xì)菌固定化的最佳條件。以細(xì)菌初始接種密度、固定化時(shí)間、固定化人造水草選材、固定化pH、固定化溫度為研究對(duì)象進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，得出這些條件因子對(duì)硝化細(xì)菌固定化效果的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)用3號(hào)人造水草

5、作為生長(zhǎng)基質(zhì)、接種密度為10<'5>cell/ml、溫度30℃、pH為7的條件下固定生長(zhǎng)16d，每g人造水草上的亞硝化菌可達(dá)8.4×10<'9> cells；而當(dāng)用3號(hào)人造水草作為生長(zhǎng)基質(zhì)、接種密度為10<'4>cell/ml、溫度30℃、pH為10的條件下固定生長(zhǎng)16d，每g人造水草上的亞硝化菌可達(dá)4.8×10<'9> cells。這說明通過硝化細(xì)菌固定化技術(shù)有可能大大提高養(yǎng)殖水體中局部硝化細(xì)菌的密度。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果方差分析表明，固定化

6、時(shí)間對(duì)亞硝化菌和亞硝化菌在人造水草上的固定化效果均有顯著影響。 研究了固定硝化細(xì)菌的人造水草在室內(nèi)對(duì)蝦養(yǎng)殖中的使用效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，整個(gè)養(yǎng)殖期間，對(duì)照池中氨氮濃度相對(duì)較高，與其它3口試驗(yàn)池差異顯著(P<0.01)。在養(yǎng)殖試驗(yàn)初始4d，采用未固定硝化細(xì)菌的人造水草的對(duì)照池，亞硝酸氮一直上升，最高值達(dá)到0.91mg/l，而投加固定硝化細(xì)菌的人造水草的實(shí)驗(yàn)池則從試驗(yàn)開始便一直快速下降。試驗(yàn)結(jié)果表明固定硝化細(xì)菌的人造水草硝化能力較強(qiáng)，前期