吉林省23份曬煙種質(zhì)資源遺傳多樣性與親緣關(guān)系的研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以吉林省常見的23份曬煙材料為試材，并以2份烤煙材料作為對(duì)照，利用形態(tài)學(xué)標(biāo)記和SSR分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)其進(jìn)行了遺傳多樣性和親緣關(guān)系分析，主要研究結(jié)果如下：
　　1、形態(tài)學(xué)標(biāo)記結(jié)果顯示：23份供試曬煙材料間的歐氏距離為1.11-8.29，第一等級(jí)劃分，可以明顯的將他們區(qū)分成兩大類，即Ⅰ1和Ⅰ2，第二等級(jí)劃分，可將所有的曬煙系列（Ⅰ2）進(jìn)一步分成兩個(gè)亞類（Ⅱ1、Ⅱ2）。第一亞類（Ⅱ1）包括：延吉自來(lái)紅、延吉千層塔、仲城五十葉、吉林琥

2、珀香、紅花矮子以及孟山草，第二亞類包括其他的17份曬煙品種，總體來(lái)看，供試曬煙品種間的遺傳基礎(chǔ)較為狹窄。
　　2、對(duì)曬煙SSR-PCR反應(yīng)體系進(jìn)行了優(yōu)化。本實(shí)驗(yàn)最適曬煙SSR反應(yīng)體系為：20μl體系中，含10×PCR buffer2μl，模板DNA20 ng，正反向引物各0.25μmol/L，Mg2+1.5mmol/L，dNTPs0.2mmol/L，Taq酶1.5 U，ddH2O10.1μL。
　　3、從已有的92對(duì)SSR引

3、物中篩選出10對(duì)多態(tài)性好的引物，對(duì)所有供試材料進(jìn)行PCR擴(kuò)增，在分子量為200bp-1000bp范圍內(nèi)，10對(duì)引物在25份供試材料中共擴(kuò)增出52條帶，其中有8條是所有品種共有的條帶，這在一定程度上揭示了各煙草種質(zhì)間的同源性,多態(tài)性條帶有44條，多態(tài)性檢出率為85％。
　　4、在SSR分子標(biāo)記中，23份供試曬煙的遺傳相似系數(shù)介于0.531-0.980，平均相似系數(shù)為0.744，說(shuō)明供試曬煙間的遺傳相似性較大，親緣關(guān)系較近，2份烤煙材

4、料與23份曬煙材料間的遺傳距離相對(duì)較遠(yuǎn)，平均值為0.627。聚類結(jié)果：第一亞類（Ⅱ1）包括9個(gè)品種，分別為紅花矮子、仲成五十葉、太興煙、孟山草、牡丹一號(hào)、松川（關(guān)東201）、延曬一號(hào)、8107、延邊紅，組內(nèi)遺傳相似系數(shù)介于0.698-0.898；第二亞類（Ⅱ2）包括其他14個(gè)曬煙品種，組內(nèi)遺傳相似系數(shù)為0.726-0.980；第三等級(jí)劃分，可在第二等級(jí)劃分結(jié)果不變的情況下再將第一亞類（Ⅱ1）劃分成兩個(gè)小亞類，即Ⅲ1、Ⅲ2，其中Ⅲ1包括紅

5、花矮子、仲成五十葉、太興煙、孟山草、牡丹一號(hào)和來(lái)自日本的松川（關(guān)東201），Ⅲ2包括其它三份曬煙（延曬一號(hào)、8107和延邊紅）。
　　5、利用SPSS軟件對(duì)形態(tài)學(xué)歐氏距離與SSR遺傳相似系數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示相關(guān)系數(shù)為r=-0.383，達(dá)到極顯著水平，為進(jìn)一步探討形態(tài)學(xué)歐氏距離與SSR遺傳相似系數(shù)確定不同品種遺傳差異的一致性程度，我們又將化學(xué)成分組合和農(nóng)藝性狀組合所得到的歐氏距離分別與 SSR分析得到的遺傳相似系數(shù)進(jìn)行相關(guān)分