南方中國荷斯坦牛耐熱性研究.pdf

1、本文分別用數(shù)量遺傳學(xué)、分子遺傳學(xué)、生化遺傳學(xué)、生物信息學(xué)研究奶牛的耐熱性能。具體工作及結(jié)論如下： (1)南方中國荷斯坦牛耐熱性相關(guān)參數(shù)的研究本研究采用公畜內(nèi)半同胞相關(guān)法，分別從產(chǎn)奶量(350頭)、耐熱產(chǎn)奶量(116頭)、直腸溫度(200頭)和紅細(xì)胞鉀(144頭)四個(gè)方面估算奶牛群體遺傳力，結(jié)果分別是0.334、0.196、0.20、0.318。運(yùn)用BLUP法估算以色列公牛育種值最高，為85.12。對數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析得到方程：y=

2、-0.23853-0.0096x<,1>+0.000827x<,2>(x<,1>為直腸溫度，x<,2>為紅細(xì)胞鉀含量>。在兩個(gè)變量中，只有紅細(xì)胞鉀含量顯著的通過了t檢驗(yàn)(P<0.05)。 (2)南方中國荷斯坦牛耐熱性RAPD標(biāo)記研究及生物信息學(xué)分析以52頭高產(chǎn)耐熱組和41頭高產(chǎn)不耐熱組中國荷斯坦牛的DNA為材料，選用200條RAPD引物，利用PCR-RAPD技術(shù)，對荷斯坦牛的耐熱性進(jìn)行研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，使用S441引物和S463引

3、物在高產(chǎn)耐熱組中分別發(fā)現(xiàn)了581bp和800bp特異性的片段(與奶牛耐熱性有關(guān)的RAPD的標(biāo)記)，回收、克隆、并測定了581bp、680bp 片段的序列。序列比較顯示，581bp的片段與KCNN2基因的同源性達(dá)90％，其可能是KCNN2基因的內(nèi)含子3；680bp 片段與 NW_001024067.1同源性達(dá)99％，NW_001024067.1的功能未知。根據(jù)己知KCNN2基因的功能，初步判斷KCNN2基因?yàn)槟蜔嵝阅艿暮蜻x基因。把581b

4、p(RAPD-S441標(biāo)記)和680bp (RAPD-S463標(biāo)記)片段提交到Genbank，得到登陸號EF123743和EF123744。利用NCBI的ORF finder在581bp片段中沒有發(fā)現(xiàn)ORF，這與上一步預(yù)測結(jié)論相符合。在680bp片段中發(fā)現(xiàn)4個(gè)ORF，分別為ORF1、ORF2、ORF3、ORF4。這4個(gè)閱讀框分別編碼48AA、34AA、45AA、34AA。并成功將RAPD-S41標(biāo)記成功轉(zhuǎn)化為SCAR標(biāo)記。 (3

5、)南方中國荷斯坦牛耐熱性SCAR標(biāo)記研究根據(jù)RAPD-S441、RAPD-S463標(biāo)記的測序結(jié)果，利用Premier5.0軟件設(shè)計(jì)對應(yīng)的SCAR引物。本研究成功將RAPD-S441標(biāo)記耐熱SCAR標(biāo)記。其能很好的區(qū)分高產(chǎn)耐熱組和高產(chǎn)不耐熱組。而RAPD-S463，沒有轉(zhuǎn)換成SCAR標(biāo)記。 (4)南方中國荷斯坦牛SSR標(biāo)記研究本論文在牛6號染色體上，均勻選擇了9個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記 (ILSTS093、DIK2029、MNB_66、BL1