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文檔簡介
1、核桃是重要的經(jīng)濟(jì)樹種,中國已經(jīng)擁有了一批優(yōu)良品種,但是對(duì)核桃品種遺傳背景的認(rèn)識(shí)尚待深入。本研究結(jié)合形態(tài)學(xué)標(biāo)記、AFLP分子標(biāo)記和SSR標(biāo)記等技術(shù),分析了核桃品種的遺傳多樣性,構(gòu)建了供試核桃品種核心種質(zhì),可為進(jìn)一步選育優(yōu)良品種奠定基礎(chǔ)。本研究所取得的主要結(jié)果如下:
?。?)利用形態(tài)學(xué)標(biāo)記進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),中國核桃的形態(tài)學(xué)性狀變異比較豐富,供試核桃品種間的歐氏距離最小為0.4946,最大達(dá)到了25.2002,平均為6.4246。同時(shí)也有
2、一定數(shù)量的品種在形態(tài)學(xué)性狀上難以區(qū)分;
?。?)以核桃一年生枝條的新鮮韌皮部為試材,采用改良的CTAB法獲得了高質(zhì)量的基因組 DNA,進(jìn)一步篩選出了17對(duì)多態(tài)性高、電泳譜帶清晰、譜帶分離狀態(tài)好的熒光引物組合,應(yīng)用這些引物組合對(duì)供試核桃和泡核桃品種進(jìn)行擴(kuò)增,取得了良好的擴(kuò)增效果,建立的熒光 AFLP指紋圖譜清晰有效、信息量大,為該法在核桃品種分子遺傳研究中的應(yīng)用奠定了良好基礎(chǔ);
?。?)應(yīng)用熒光 AFLP體系,對(duì)中國136
3、個(gè)核桃和泡核桃品種進(jìn)行分析,構(gòu)建了136個(gè)品種的熒光AFLP指紋圖譜,檢測到了75個(gè)品種的314條特有帶和1個(gè)品種的1條特?zé)o帶,通過這些特征帶能夠快速地將相應(yīng)品種從全部136個(gè)供試品種中辨別出來,其余材料可通過差異帶進(jìn)行區(qū)分;
?。?)供試核桃品種的AFLP擴(kuò)增得到了3100條可統(tǒng)計(jì)的條帶,其中3008條呈多態(tài)性,平均多態(tài)性帶百分率為96.97%。所有供試核桃品種的遺傳相似系數(shù)范圍為0.1397~0.8587,平均為0.5341
4、;等位基因頻率平均為0.8358、有效等位基因數(shù)平均為1.3091、基因多樣度平均為0.2867、Shannon信息指數(shù)平均為0.1956,顯示中國核桃品種的遺傳多樣性處于中等水平?;贒ICE遺傳相似系數(shù)構(gòu)建了136個(gè)核桃品種的聚類圖,從分子水平上分析了它們的遺傳多樣性和親緣關(guān)系,揭示了我國核桃品種遺傳背景的復(fù)雜性,在實(shí)際應(yīng)用中不僅可根據(jù)指紋圖譜和聚類結(jié)果進(jìn)行親本選配,還可為核桃品種的鑒定、已知品種的保護(hù)、品種間的比較提供依據(jù);
5、> ?。?)采用AFLP分子標(biāo)記與形態(tài)學(xué)標(biāo)記偶合的方法構(gòu)建了供試核桃品種的核心種質(zhì),抽樣比例為18%,保留了95%以上的遺傳多樣性,能夠較好地代表初始種質(zhì);
?。?)利用AFLP數(shù)據(jù)對(duì)核桃和泡核桃種間分類關(guān)系進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)核桃的遺傳多樣性主要存在于群體內(nèi),群體內(nèi)的變異大于群體間的變異。FCA分析和UPGMA聚類結(jié)果與遺傳變異分析結(jié)果相一致,研究結(jié)果支持核桃與泡核桃可能為同一個(gè)種;
(7)采用SSR反應(yīng)體系對(duì)33個(gè)核桃及
6、泡核桃品種進(jìn)行分析,共檢測到了117個(gè)等位基因,多態(tài)位點(diǎn)百分率達(dá)到了100%,平均觀察雜合度(Ho)與期望雜合度(He)分別為0.3977和0.6152,與AFLP的結(jié)果相結(jié)合進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn):首先,研究結(jié)果支持核桃與泡核桃為同一個(gè)種下的不同生態(tài)地理型的結(jié)論;其次,早實(shí)類型與晚實(shí)類型的差異未能從基因組DNA酶切片段和SSR上體現(xiàn)出來;第三,大部分川核系列品種與泡核桃品種聚在一起,顯示其親緣關(guān)系較為密切;最后,‘北京861’、‘新光’等品種具
7、有優(yōu)異的經(jīng)濟(jì)性狀且與其它品種間的遺傳距離較遠(yuǎn),有利于遺傳變異的產(chǎn)生,善加利用將有可能成為優(yōu)秀的育種材料;
?。?)細(xì)胞核核糖體 IGS區(qū)的DNA序列為典型的雙親遺傳,在奇異雜種基因組的細(xì)胞核核糖體DNA IGS8-ETS1區(qū)中檢測到了雙親本的遺傳成分(約87.50%~88.89%)和子代特有的新的遺傳成分(約11.11%~12.50%)。奇異雜種的遺傳形成涉及到了核桃J.regia(核桃組)以及如下6種黑核桃(黑核桃組),即:北
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