土茯苓化學(xué)對(duì)照品及質(zhì)量綜合評(píng)價(jià)研究.pdf

1、土茯苓為百合科植物光葉菝葜(Smilax glabra Roxb.)的干燥根莖。有除濕，解毒，通利關(guān)節(jié)之功效。臨床用于濕熱淋濁，帶下，癰腫，瘰疬，疥癬，梅毒及汞中毒所致的肢體拘攣，筋骨疼痛。本論文對(duì)其進(jìn)行了化學(xué)成分、化學(xué)對(duì)照品、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及藥理作用四個(gè)方面的研究。 土茯苓藥材化學(xué)成分研究。從土茯苓中分離得到20個(gè)化合物，經(jīng)IR、UV、MS、<'1>H-NMR、<'13>CNMR、HMBC、HSQC、DEPT等手段及化學(xué)方法鑒定出1

2、7個(gè)化合物。它們分別為槲皮素、落新婦苷、白藜蘆醇、β-谷甾醇、豆甾醇、(-)表兒茶素、柚皮素、莽草酸、琥珀酸、阿魏酸、胡蘿卜苷、花旗松素、棕櫚酸、5-O-咖啡酰莽草酸、5-羥甲基糠醛、木蠟酸、尼克酰胺，其中木蠟酸為首次從該植物中分離得到。采用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用技術(shù)對(duì)土茯苓揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，鑒定出21個(gè)化合物，主要為芳香族化合物。 土茯苓化學(xué)對(duì)照品研究。通過(guò)優(yōu)化提取分離條件，建立了落新婦苷化學(xué)對(duì)照品的制備工藝，該工

3、藝能大量、快速地獲得落新婦苷，并且建立了該對(duì)照品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。共累積得到2g(純度≥98％)以上的落新婦苷對(duì)照品。 土茯苓藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。以總黃酮含量為指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，對(duì)乙醇濃度、溶劑用量、提取時(shí)間3因素進(jìn)行優(yōu)化，確定了土茯苓總黃酮提取工藝。建立了土茯苓中總黃酮的定量分析方法，證明了選擇落新婦苷作為土茯苓總黃酮含量測(cè)定對(duì)照品的合理性和科學(xué)性。采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定10批不同來(lái)源的土茯苓藥材中落新婦苷和白藜蘆醇的含量。

4、對(duì)10批不同來(lái)源的土茯苓藥材進(jìn)行了HPLC指紋圖譜分析，相似度結(jié)果較好(相似度大于0.900)，確定了10個(gè)共有峰，并用HPLC．MS和HPLC-<'1>H NMR法對(duì)部分特征峰進(jìn)行指認(rèn)。采用指紋圖譜方法鑒別了土茯苓正品及其常見(jiàn)的3種混淆品。 對(duì)土茯苓4個(gè)提取部位以及化合物落新婦苷進(jìn)行了抗菌、抗氧化、抗乙肝病毒、抗SIVmac251病毒和抗腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究。結(jié)果表明，土茯苓乙酸乙酯部位對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、志賀氏痢

5、疾桿菌均有抑制作用；土茯苓水煎液和落新婦苷對(duì)這5種菌均沒(méi)有抑制作用。土茯苓各提取部位以及落新婦苷均有較好的抗自由基活性；對(duì)乙肝病毒以及HepG2細(xì)胞都沒(méi)有抑制作用。此外，土茯苓乙醇提取物對(duì)Hela，細(xì)胞表現(xiàn)出一定的抑制作用；土茯苓乙醇提取物以及正丁醇部位對(duì)SIVmac251病毒有一定的抑制作用。上述研究結(jié)果為土茯苓的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了科學(xué)依據(jù)；為評(píng)價(jià)土茯苓整體功效與上述各藥理指標(biāo)之間的關(guān)聯(lián)關(guān)系，應(yīng)用貝葉斯網(wǎng)絡(luò)對(duì)其清熱解毒作用進(jìn)行預(yù)測(cè)，進(jìn)一步