茯苓佐劑活性多糖的化學(xué)研究.pdf

1、茯苓是多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf.的干燥菌核，為利水滲濕之主藥。多糖是茯苓中主要成分之一。
　　本論文將茯苓粉末在60℃條件下采用溫水浸提、醇沉、透析和冷凍干燥獲得總多糖（Poria cocos polysaccharides，PCP），提取率為0.25％，糖含量為58.05%，由巖藻糖（Fuc）、甘露糖（Man）、葡萄糖（Glc）和半乳糖（Gal）組成，單糖摩爾比分別為Fuc:Man:Glc:G

2、al=1.00:1.96:0.95:4.94。PCP能顯著提高卵白蛋白（OVA）免疫小鼠的特異性抗體滴度。本論文分別用H1N1流感疫苗和乙型肝炎疫苗抗原（HBsAg）追蹤總多糖中具有疫苗佐劑活性的多糖成分，并進(jìn)行其理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)表征的研究。
　　首先，茯苓總多糖PCP經(jīng)DEAE-Cellulose柱層析分離獲得二個(gè)組分PCP-A和PCP-B，得率分別為30.4%和33.7%。PCP-A為峰高分子量為2.82×104 Da的一個(gè)非對(duì)

3、稱峰，PCP-B含有二個(gè)含糖峰，其中一個(gè)峰高分子量以2.86×104 Da為主，同時(shí)還有一個(gè)分子量超過(guò)5.0×105 Da的低色譜峰。PCP-A和PCP-B均由巖藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖組成，其中PCP-A的單糖摩爾比為Fuc:Man:Glc:Gal=1.00:1.82:0.37:5.67，PCP-B的單糖摩爾比為Fuc:Man:Glc:Gal=1.00:1.86:4.46:7.20。
　　PCP-A采用Sephadex G-

4、100柱層析純化獲得分子量均一多糖PCP-Ⅰ。PCP-B同樣經(jīng)過(guò)Sephadex G-100柱層析分離和純化獲得分子量均一多糖PCP-Ⅱ。PCP-Ⅰ的峰高分子量為2.79×104 Da，PCP-Ⅱ的峰高分子量為2.90×104 Da。PCP-Ⅰ和PCP-Ⅱ也均由巖藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖四種單糖組成，其中PCP-Ⅰ的單糖摩爾比為Fuc:Man:Glc:Gal=1.00:1.81:0.27:7.27，PCP-Ⅱ的單糖摩爾比為Fuc:M

5、an:Glc:Gal=1.00:1.63:0.16:6.29。
　　PCP-Ⅰ和PCP-Ⅱ通過(guò)高碘酸氧化、Smith降解、甲基化反應(yīng)，并結(jié)合IR、NMR、GC、GC-MS分析，推測(cè)其結(jié)構(gòu)特征如下：
　　（1）PCP-Ⅰ含有α和β構(gòu)型，半乳糖為主要骨架單糖，其主要連接方式有(1→6)、(1→2,6)、(1→2,4)和末端片段四種主要連接方式及少量(1→3,6)片段；巖藻糖主要有(1→3)和末端片段；甘露糖主要有(1→2)和少量