中藥多糖組方的佐劑效應(yīng)研究.pdf

1、目的：
　　通過正交設(shè)計(jì)將黃芪多糖（APS）、香菇多糖（LNT）和枸杞多糖（LBP）按不同的比例構(gòu)成系列組方，通過對(duì)脾淋巴細(xì)胞增殖率、免疫臟器指數(shù)、體重增長(zhǎng)率以及特異性抗體含量的檢測(cè)，優(yōu)選出一種具有較強(qiáng)免疫佐劑效應(yīng)的中藥多糖組方。
　　方法：
　　1、中藥多糖的免疫佐劑組方篩選
　　將110只昆明小鼠隨機(jī)平均分為正常對(duì)照組、免疫抑制模型組和9個(gè)中藥多糖組方組（9組），采用灌胃的方式給予相應(yīng)藥物，連續(xù)用藥14 d。

2、除正常對(duì)照組給予生理鹽水外，其余各組小鼠分別于第3、6、9d腹腔注射環(huán)磷酰胺。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)檢測(cè)相應(yīng)藥物作用后脾淋巴細(xì)胞的增殖情況，并結(jié)合其對(duì)小鼠免疫臟器指數(shù)和體重增長(zhǎng)率的影響，篩選出一個(gè)免疫增強(qiáng)功能最強(qiáng)的最適中藥組方。
　　2、優(yōu)選多糖組方的免疫佐劑效應(yīng)研究
　　將90只昆明小鼠隨機(jī)平均分為無佐劑組、鋁佐劑組、優(yōu)選配方組。免疫優(yōu)選配方組及無佐劑組小鼠分別通過腹部皮下注射OVA免疫小鼠；鋁佐劑組采用自制鋁佐劑，與OVA混合

3、后免疫小鼠。14天后進(jìn)行二次免疫。兩次免疫前3天均連續(xù)灌胃優(yōu)選配方組小鼠優(yōu)選組方。通過酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)（ELISA），檢測(cè)小鼠血清中OVA-IgG的含量，并結(jié)合免疫臟器指數(shù)，研究?jī)?yōu)選多糖組方對(duì)OVA免疫小鼠后產(chǎn)生抗體的含量、持續(xù)時(shí)間及其對(duì)免疫臟器指數(shù)的影響。
　　結(jié)果：
　　1、大多數(shù)中藥多糖組方對(duì)免疫抑制小鼠具有免疫增強(qiáng)作用
　　組方1、2、5、7組脾 T細(xì)胞增殖指數(shù)較免疫抑制組顯著升高，分別增加96.30％、116

4、.3%、98.52%、94.81%。組方1、3、6、7、9組較正常組脾臟指數(shù)明顯升高，分別增加44.80%、75.27%、42.65%、52.69%、44.80%。組方6、7、8、9組較正常組小鼠胸腺指數(shù)無明顯差異，其余組方組均小于正常組。組3、4、5、7、8較CP組體重增長(zhǎng)率明顯增加，分別增加40.1%、24.8%、26.0%、23.5%、19.4%。組1、2、9與正常組比較體重增長(zhǎng)率顯著降低（P<0.05），除組3高于正常組外，其余

5、各組與正常組均無顯著差異（P>0.05）。經(jīng)方差分析后比較得出，組7（即黃芪：香菇：枸杞多糖為3:1:3）可抵抗由環(huán)磷酰胺所引起的小鼠免疫抑制狀態(tài)，增強(qiáng)小鼠免疫功能，在所檢測(cè)的組方中最強(qiáng)。因此，后續(xù)研究以該組方為優(yōu)選的最佳比例組方進(jìn)行試驗(yàn)（稱做：優(yōu)選配方組）。
　　2、優(yōu)選配方組的免疫佐劑作用較為顯著
　　優(yōu)選配方組在二免后第2w時(shí)血清OVA-IgG含量出現(xiàn)明顯提升，顯著高于同時(shí)間點(diǎn)的無佐劑組（P<0.05）；在第3w時(shí)優(yōu)選

6、配方組含量均值有高于無佐劑組的趨勢(shì)。優(yōu)選配方組脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)均值在各時(shí)間點(diǎn)，均有高于無佐劑組趨勢(shì)（P>0.05）。說明優(yōu)選配方作為OVA抗原佐劑，可以提高和維持脾臟和胸腺的功能，可以促進(jìn)血清OVA-IgG的產(chǎn)生，延長(zhǎng)了抗體的持續(xù)期。
　　結(jié)論：
　　1、不同比例的黃芪、香菇、枸杞多糖合用可以不同程度地增強(qiáng)免疫低下機(jī)體的免疫功能；
　　2、優(yōu)選配方組能促進(jìn)OVA免疫小鼠產(chǎn)生IgG，可延長(zhǎng)抗體的持續(xù)期，且對(duì)脾臟、胸腺功