板藍(lán)根多糖的化學(xué)分離及其免疫增強(qiáng)活性的研究.pdf

1、板藍(lán)根為十字花科菘藍(lán)屬植物菘藍(lán)Isatis indigotica Fort的干燥根，性寒味苦，有清熱解毒、涼血消腫的功效。板藍(lán)根中含有豐富的有機(jī)酸類、生物堿類及多糖成分，這些成分各自發(fā)揮不同的藥理活性，共同使板藍(lán)根發(fā)揮抗內(nèi)毒素、抗病毒、抗炎以及免疫調(diào)節(jié)的藥理作用。 目的:建立板藍(lán)根多糖（IIF）化學(xué)分離的工藝流程?？疾彀逅{(lán)根多糖對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞分泌IL-10、INF-γ以及NK細(xì)胞活性的影響。 方法: 提取工藝：以

2、浸膏得率為指標(biāo)，考察提取溫度、煎煮時(shí)間和加水量對(duì)多糖提取效果的影響，確定多糖提取的最佳工藝條件。以脫色率為指標(biāo)，設(shè)計(jì)3因素3水平的正交設(shè)計(jì)表，考察樹脂類型、上樣量、流速對(duì)多糖脫色效果的影響，選擇適宜對(duì)板藍(lán)根多糖進(jìn)行脫色的樹脂。脫色后的多糖溶液裝入透析袋內(nèi)透析，除去多糖溶液中的小分子物質(zhì)。以多糖的損失率為指標(biāo)，考察不同透析時(shí)間對(duì)多糖透析效果的影響。利用凝膠層析技術(shù)，分別采用兩種不同型號(hào)和功能的凝膠純化得到板藍(lán)根多糖－IIF，并利用薄層層析

3、技術(shù)和HPLC-ELSD系統(tǒng)檢測(cè)IIF的純度和分子量。（整個(gè)提取、純化過程均采用硫酸-苯酚法跟蹤檢測(cè)多糖的含量） 活性研究：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Elisa）考察板藍(lán)根多糖對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞分泌IL-10和IFN-γ數(shù)量的影響，同時(shí)利用乳酸脫氫酶釋放法測(cè)定IIF對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響。 結(jié)果:經(jīng)過初提、脫色、超濾、純化4步工序得到的板藍(lán)根多糖純度為93％；分子量為65×104；其體外活性試驗(yàn)研究表明，板藍(lán)根多糖能明顯提高小