泰山梧桐花多糖對(duì)雛雞的免疫增強(qiáng)作用研究.pdf

1、近年來(lái)，家禽養(yǎng)殖業(yè)飛速發(fā)展，但免疫抑制性疾病卻流行嚴(yán)重，使疾病多發(fā)難控，導(dǎo)致對(duì)疫苗和抗生素的依賴(lài)加強(qiáng)，與此同時(shí)，疫苗的免疫效力減弱、抗生素濫用使得病原的耐藥性增強(qiáng)等種種弊端也逐漸暴露出來(lái)，多種新型綠色免疫增強(qiáng)劑和免疫佐劑應(yīng)運(yùn)而生。植物多糖由于材料來(lái)源廣泛、價(jià)格低廉、功效明顯，并在解決藥物殘留和控制疫病方面有明顯優(yōu)勢(shì)，成為新型免疫增強(qiáng)劑的首選。多糖是一種大分子物質(zhì)，由多個(gè)單糖縮合失水而成，結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜、種屬特異性強(qiáng)。多糖己被證實(shí)具有抗氧化

2、、抗腫瘤、抗粘附、降低血糖等醫(yī)藥功效，但其最引人矚目的還是其免疫調(diào)節(jié)的作用，這也是近年來(lái)關(guān)于多糖研究的熱點(diǎn)。到目前為止，許多植物多糖已被證明具有免疫增強(qiáng)作用。
　　 梧桐花，為馬鞭草科植物臭梧桐的花，據(jù)《本草綱目拾遺》記載梧桐花有祛風(fēng)、降壓、止痢等功效，具有較高的藥用價(jià)值。目前我國(guó)梧桐花的種植逐漸形成規(guī)模，梧桐花的藥用價(jià)值受到廣泛關(guān)注，并取得了豐富的研究成果，但是國(guó)內(nèi)對(duì)于梧桐花的研究?jī)H限于對(duì)其成分的提取、分析和人類(lèi)保健品的研究與

3、開(kāi)發(fā)，而對(duì)梧桐花多糖應(yīng)用于畜禽疫病防治方面的研究則鮮有報(bào)道。本研究室所在的泰山地區(qū)得天獨(dú)厚的自然環(huán)境和地理特征為梧桐樹(shù)的規(guī)模種植提供了便利，因此，本課題組以泰山梧桐花為研究對(duì)象，所用原料均是課題組成員在初春時(shí)采自泰山地區(qū)的新鮮梧桐花，風(fēng)干破碎后用水提醇沉法提取了粗多糖，同時(shí)經(jīng)過(guò)抽提脂肪、去除蛋白質(zhì)等步驟去除了多糖中的雜質(zhì)，保證了粗多糖較高的純度。試驗(yàn)中選取由SPF胚孵化的健康雛雞為動(dòng)物模型，探討梧桐花多糖對(duì)雛雞的免疫增強(qiáng)作用。旨在將其研

4、制成新型植物免疫增強(qiáng)劑，為健康畜牧業(yè)的發(fā)展做貢獻(xiàn)。
　　 本研究共分為以下二個(gè)部分:
　　 第一部分泰山梧桐花多糖對(duì)雛雞脾臟淋巴細(xì)胞增殖的影響研究
　　 為探究泰山梧桐花多糖(TFSFPS)對(duì)雛雞脾臟淋巴細(xì)胞體內(nèi)外增殖的影響，本研究分兩部分進(jìn)行試驗(yàn):第一部分，分別向兩組雛雞注射3種濃度(400μg/mL、200μg/mL、100μg/mL)的TFSFPS，同時(shí)設(shè)置泰山松花粉對(duì)照組（TPPPS，濃度為400μg/m

5、L）和空白對(duì)照組，在第7d、14d、21d時(shí)制備脾淋巴細(xì)胞，用PI染色法測(cè)定雛雞脾臟淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率;第二部分，將三種濃度的TFSFPS分別加入到體外分離培養(yǎng)的雞脾臟淋巴細(xì)胞中，同樣設(shè)置TPPPS對(duì)照組，培養(yǎng)48h后，用PI染色法測(cè)定雞脾臟淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。結(jié)果表明，在脾淋巴細(xì)胞體內(nèi)增殖試驗(yàn)中，三種濃度TFSFPS作用下的脾臟淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率均顯著高于空白對(duì)照組，但小于TPPPS對(duì)照組對(duì)脾臟淋巴細(xì)胞增殖的刺激作用;在脾淋巴細(xì)胞體外增殖試驗(yàn)中，

6、兩種多糖組的脾臟淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率同樣顯著高于對(duì)照組，TPPPS組的脾臟淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率均高于同濃度的TFSFPS組。由此表明，TFSFPS對(duì)雞脾臟淋巴細(xì)胞的體內(nèi)、外增殖均有刺激作用，但是刺激作用弱于TPPPS。本試驗(yàn)結(jié)果對(duì)于TFSFPS開(kāi)發(fā)成新型免疫增強(qiáng)劑提供了理論依據(jù)。
　　 第二部分泰山梧桐花多糖對(duì)雛雞免疫增強(qiáng)作用的研究
　　 為研究泰山梧桐花多糖對(duì)雛雞免疫增強(qiáng)作用及其對(duì)免疫抑制雛雞的免疫調(diào)理作用，本課題組選取由1日齡S

7、PF胚孵化的健康雛雞225只，隨機(jī)分為9個(gè)組:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組為T(mén)FSFPS組，分別于頸部皮下注射TFSFPS400 mg/mL、200mg/mL、100 mg/mL;Ⅳ、V、Ⅵ組為T(mén)FSFPS+CTX組，各組在注射三種濃度的多糖的同時(shí)注射40 mg/kg CTX;Ⅶ組為CTX對(duì)照組，只注射40 mg/kg CTX，Ⅷ組為T(mén)PPPS對(duì)照組，注射400 mg/mLTPPPS，Ⅸ組為空白對(duì)照組，注射等量滅菌生理鹽水。所有雛雞免疫新城疫滅活苗，分