重組雞IL-18復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)新城疫疫苗免疫增強(qiáng)作用的研究.pdf

1、白細(xì)胞介素-18是一種重要的細(xì)胞因子，具有多種生物學(xué)活性，在介導(dǎo)細(xì)胞免疫、抵御病毒感染、抗腫瘤方面起著非常關(guān)鍵的作用。植物血凝素和2-脫氧葡萄糖分別在刺激淋巴細(xì)胞增殖、直接抑制病毒繁殖方面有著顯著的效果，在畜禽病毒性疫病治療方面已有廣泛應(yīng)用。新城疫疫苗免疫失敗以及隱性感染使得非典型新城疫常有發(fā)生，給養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本試驗(yàn)以植物血凝素和2-脫氧葡萄糖的有效劑量和常用劑量，配合不同劑量重組雞白細(xì)胞介素-18，配制成復(fù)合免疫增強(qiáng)劑

2、，聯(lián)合新城疫疫苗免疫雛雞，研究其對(duì)新城疫疫苗的免疫增強(qiáng)效果。
　　應(yīng)用新城疫弱毒苗對(duì)7日齡雛雞首免，5h后使用不同比例配方的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑分別經(jīng)口服、肌肉注射途徑免疫雛雞，分開飼養(yǎng)；21日齡先后用新城疫中等毒力疫苗和復(fù)合免疫增強(qiáng)劑二免。首免后每隔7d，每組隨機(jī)取10只雞，無菌心臟采血，分離淋巴細(xì)胞測(cè)定其淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率；分離血清， ELISA檢測(cè)試劑盒測(cè)定血清中白細(xì)胞介素-2和γ-干擾素含量；血凝和血凝抑制試驗(yàn)測(cè)定血清中新城疫抗體水

3、平；雛雞頸椎脫臼處死，稱量并記錄體重，解剖取其脾臟和法氏囊并稱量記錄，計(jì)算其免疫器官指數(shù)；35日齡時(shí)使用新城疫F48強(qiáng)毒株對(duì)各組剩余雛雞經(jīng)點(diǎn)眼滴鼻攻毒，觀察并記錄雞群狀態(tài)和死亡率。
　　結(jié)果顯示，肌肉注射含重組雞白細(xì)胞介素-18蛋白的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑能夠顯著提高雞血清中γ-干擾素和白細(xì)胞介素-2水平，隨白細(xì)胞介素-18蛋白量的增加，其表達(dá)水平有升高趨勢(shì)，且以注射后第7d-14d表達(dá)含量最高，分別為43ng/L和70ng/L，至少在2

4、8d仍能維持較高水平；經(jīng)口服途徑免疫，含雞白細(xì)胞介素-18重組菌的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑也能顯著提高雞血清中γ-干擾素和白細(xì)胞介素-2水平，免疫后第7d，其表達(dá)水平最高，分別為50ng/L和62ng/L，之后稍有下降，隨IL-18重組菌量的增加，γ-干擾素和白細(xì)胞介素-2表達(dá)水平變化不大。復(fù)合免疫增強(qiáng)劑經(jīng)肌肉注射、口服途徑均能顯著提高新城疫疫苗免疫雞群的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、抗體水平和免疫器官指數(shù)，且肌肉注射效果較口服效果好，隨白細(xì)胞介素-18蛋白量

5、的增加，淋轉(zhuǎn)率和抗體水平均有升高趨勢(shì)，平均抗體滴度在二免7d左右達(dá)到最高值10.2(log2)，對(duì)免疫器官的早期發(fā)育具有顯著的促進(jìn)效果，對(duì)脾臟中期發(fā)育也有促進(jìn)作用，能夠明顯提升免疫雞群對(duì)新城疫強(qiáng)毒株的抵抗力。
　　試驗(yàn)結(jié)果表明，由重組雞白細(xì)胞介素-18、植物血凝素和2-脫氧葡萄糖組成的復(fù)合免疫增強(qiáng)劑，在誘生白細(xì)胞介素-2和γ-干擾素、促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)化、提高新城疫抗體水平、促進(jìn)免疫器官發(fā)育、提升對(duì)新城疫毒株的抵抗力方面，能夠顯