復(fù)合免疫增強(qiáng)劑組方的篩選及其抗免疫應(yīng)激作用的研究.pdf

1、本研究通過淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)初步篩選出復(fù)合免疫增強(qiáng)劑的組方，然后通過飼養(yǎng)試驗(yàn)測(cè)定斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能、血漿免疫指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)，確定了一種復(fù)合免疫增強(qiáng)劑的組方，并應(yīng)用大腸桿菌脂多糖（LPS）應(yīng)激模型探討了該復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)斷奶仔豬的血漿激素水平、炎性細(xì)胞因子水平及血漿免疫指標(biāo)的影響。本研究分為四個(gè)試驗(yàn)： 試驗(yàn)一復(fù)合免疫增強(qiáng)劑組方的體外篩選試驗(yàn)為了篩選出免疫增強(qiáng)作用效果較好的中草藥提取物復(fù)合組方，將黃芪多糖（APS）、淫羊藿多糖（EP

2、S）、牛膝多糖（ABPS）和刺五加皂甙（ASS）按等質(zhì)量比組成四種不同的復(fù)方制劑，分別為APS+EPS、APS+ASS、APS+ABPS+EPS和APS+ABPS+ASS，用不含胎牛血清的RPMI-1640 培養(yǎng)液配制成50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL 和800μg/mL 五種不同濃度的溶液，分別加入到培養(yǎng)的仔豬外周血液淋巴細(xì)胞中，培養(yǎng)72 小時(shí)，用MTT 法測(cè)定淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)。結(jié)果表明：四種復(fù)方制

3、劑在適宜濃度下均能促進(jìn)ConA 或LPS 誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)，且復(fù)方制劑APS+ASS 和APS+ABPS+ASS 的效果較好。 試驗(yàn)二復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、免疫功能及機(jī)體抗氧化功能的影響為比較復(fù)方A（APS+ASS）和復(fù)方B（APS+ABPS+ASS）兩種免疫增強(qiáng)劑的應(yīng)用效果，試驗(yàn)選用來(lái)源相同、健康的平均體重為9.29±0.53kg、年齡為31±3d的大約克斷奶仔豬32頭，按體重隨機(jī)分為4個(gè)日糧處理，每個(gè)處理4

4、個(gè)重復(fù)（欄）每個(gè)重復(fù)（欄）2頭仔豬。四個(gè)日糧處理組分別為對(duì)照組（基礎(chǔ)日糧，不含抗生素）、黃芪多糖組（基礎(chǔ)日糧+0.05％黃芪多糖）、復(fù)方A組（基礎(chǔ)日糧+0.05％復(fù)方A免疫增強(qiáng)劑）和復(fù)方B組（基礎(chǔ)日糧+0.05％復(fù)方B免疫增強(qiáng)劑）。試驗(yàn)仔豬用四種日糧飼喂，進(jìn)行為期14天的飼養(yǎng)試驗(yàn)，測(cè)定仔豬的生長(zhǎng)性能。試驗(yàn)期末，對(duì)試驗(yàn)豬進(jìn)行前腔靜脈采血，測(cè)定血漿常規(guī)生化指標(biāo)、免疫指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)。結(jié)果表明：斷奶仔豬日糧中添加復(fù)方A免疫增強(qiáng)劑顯著提高了仔豬

5、的日增重（ADG），降低料重比（F/G）；顯著提高血漿γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）和一氧化氮合酶活性（NOS）以及血漿中免疫球蛋白（IgG）水平；顯著降低了血漿丙二醛（MDA）的含量。 試驗(yàn)三復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)斷奶仔豬免疫指標(biāo)、血漿激素及炎性細(xì)胞因子水平和常規(guī)生化指標(biāo)的影響為了研究復(fù)方A 免疫增強(qiáng)劑對(duì)斷奶仔豬免疫指標(biāo)、血漿激素及炎性細(xì)胞因子水平和常規(guī)生化指標(biāo)的影響，試驗(yàn)選用來(lái)源一致、健康的平均體重為6.51±0.19kg、平均年齡為

6、23±3d 的杜洛克×長(zhǎng)白×大白斷奶仔豬16 頭，按體重隨機(jī)分為2 個(gè)日糧處理，每個(gè)處理4 個(gè)重復(fù)（欄），每個(gè)重復(fù)（欄）2 頭仔豬。 兩個(gè)日糧處理組分別為對(duì)照組（基礎(chǔ)日糧，不含抗生素）和試驗(yàn)組（基礎(chǔ)日糧+0.05％復(fù)方A 免疫增強(qiáng)劑）。用兩種日糧飼喂仔豬，進(jìn)行為期27d 的飼養(yǎng)試驗(yàn)。 試驗(yàn)第14d，從前腔靜脈采血測(cè)定血漿激素及炎性細(xì)胞因子水平、外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率等，同時(shí)對(duì)所有試驗(yàn)豬只每千克體重耳后肌肉注射牛血清白蛋白（

7、BSA）1mg，于注射后第7d 采血測(cè)定血清BSA 抗體水平。試驗(yàn)第21d 在仔豬左腿內(nèi)側(cè)距最后乳頭5cm 及距腹中線5cm處皮下注射植物血球凝集素（PHA）進(jìn)行皮膚過敏試驗(yàn)。結(jié)果表明：斷奶仔豬日糧中添加復(fù)方A 免疫增強(qiáng)劑提高了植物血球凝集素（PHA）刺激的皮褶厚度增加值；降低了血漿生長(zhǎng)抑素（SS）和胰高血糖素（PG）水平以及乳酸脫氫酶（LDH）的活性。 試驗(yàn)四復(fù)合免疫增強(qiáng)劑對(duì)LPS 應(yīng)激斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、血漿激素及炎性細(xì)胞因子

8、水平和免疫指標(biāo)的影響試驗(yàn)選用來(lái)源一致、健康的平均體重為6.51±0.19kg、平均年齡為23±3d 的杜洛克×長(zhǎng)白×大白斷奶仔豬16 頭，按體重隨機(jī)分為2 個(gè)日糧處理，每個(gè)處理4個(gè)重復(fù)（欄），每個(gè)重復(fù)（欄）2 頭仔豬。兩個(gè)日糧處理組分別為對(duì)照組（基礎(chǔ)日糧，不含抗生素）和試驗(yàn)組（基礎(chǔ)日糧+0.05％復(fù)方A 免疫增強(qiáng)劑）。分別用兩種日糧飼喂仔豬，進(jìn)行了為期27d 的飼養(yǎng)試驗(yàn)。試驗(yàn)第23d 對(duì)所有試驗(yàn)豬只腹膜注射100μg/kgBW 的LPS