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文檔簡(jiǎn)介
1、本研究選用杜長(zhǎng)大保育豬為試驗(yàn)材料,就不同氨基酸和免疫增強(qiáng)劑(黃芪多糖、益生菌)的互作對(duì)保育豬生長(zhǎng)性能、免疫性能、豬瘟抗體水平、腸道黏膜免疫系統(tǒng)發(fā)育的影響進(jìn)行比較分析,并利用大腸桿菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)以模擬仔豬免疫應(yīng)激狀態(tài),旨在揭示保育豬在不同氨基酸和免疫增強(qiáng)劑的互作下的抗病力及抗應(yīng)激差異的免疫學(xué)機(jī)理,并確定氨基酸和免疫增強(qiáng)劑的最佳組合;為養(yǎng)豬從營(yíng)養(yǎng)免疫角度來(lái)尋找更健康、更安全的飼養(yǎng)管理方法和抗生素替代
2、思路提供依據(jù)。本試驗(yàn)研究分為三個(gè)部分。
第一部分:不同氨基酸與免疫增強(qiáng)劑對(duì)保育豬生長(zhǎng)發(fā)育及抗應(yīng)激能力影響的研究。
選擇31±1日齡健康的保育豬675頭,將試豬隨機(jī)分為9個(gè)組,每個(gè)組3個(gè)重復(fù)(欄),每個(gè)重復(fù)25頭豬,公母比例接近。試驗(yàn)采用2×4多因素完全隨機(jī)化試驗(yàn)設(shè)計(jì),分別是在基礎(chǔ)日糧中添加0.14%蘇氨酸(Thr)、0.15%蛋氨酸(Met)、0.86%精氨酸(Arg)、1.0%谷氨酰胺(Gln)與0.03%黃芪多糖
3、(APS)、0.15%益生素,兩兩相互組合,共8個(gè)試驗(yàn)處理組,1個(gè)基礎(chǔ)日糧對(duì)照組。試驗(yàn)期30天,分為飼養(yǎng)試驗(yàn)(25d)和LPS免疫應(yīng)激試驗(yàn)(5d)兩階段。試驗(yàn)結(jié)果表明:
(1)生長(zhǎng)性能:Thr、Met、Arg與APS、益生菌的互作對(duì)提高仔豬日增重?zé)o顯著作用(P>0.05);而Gln與APS、益生素的互作能顯著促進(jìn)仔豬的生長(zhǎng)性能(P<0.05);
(2)生化指標(biāo):各組合的互作對(duì)應(yīng)激前仔豬機(jī)體的尿素氮、總膽固醇和甘油三酯
4、等的含量無(wú)顯著影響(P>0.05),但 Gln+益生素、Arg+APS能顯著抑制應(yīng)激后尿素值的升高(P<0.05);
(3)血清酶活性:應(yīng)激前Met+益生素、Arg+APS能顯著促進(jìn)r-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)升高(P<0.05),Gln+APS極顯著提高谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AIL)(P<0.01),而LPS應(yīng)激后Gln+APS組的GGT、AIL均極顯著下降(P<0.01);
(4)抗氧化指標(biāo):應(yīng)激前,各組合均不同程度促進(jìn)了血
5、清中丙二醛(MDA)的升高,Thr+APS組影響極顯著(P<0.01),Thr+益生素、Gln+益生素、Gln+APS、Met+APS、Arg+APS組影響顯著(P<0.05),而應(yīng)激后各組合極顯著抑制了MDA的升高(P<0.01),其中Met+APS組抑制效果最優(yōu)。
(5)體液免疫指標(biāo):各組合對(duì)總蛋白、白蛋白、球蛋白等指標(biāo)在應(yīng)激前后均無(wú)顯著影響(P>0.05),而精Arg+益生素、Gln+益生素、Gln+APS、Thr+AP
6、S等組極顯著地促進(jìn)了免疫球蛋白g(IgG)的升高,同時(shí)又極顯著地抑制了應(yīng)激后IgG的下降(P<0.01);
(6)血液生理指標(biāo):應(yīng)激前后,各試驗(yàn)組合對(duì)白細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、紅細(xì)胞、紅細(xì)胞壓積等指標(biāo)無(wú)顯著影響(P>0.05);
(7)生長(zhǎng)激素和促生長(zhǎng)因子:應(yīng)激前,各組合均極顯著地促進(jìn)血液中生長(zhǎng)激素(GH)、生長(zhǎng)抑素(SS)的升高(P<0.01),以Gln+APS、Arg+益生素對(duì)GH的效果最好,而Gln+益生素對(duì)SS的
7、影響最大,而對(duì)胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)無(wú)顯著影響(P>0.05);應(yīng)激后,各組合仍能顯著促進(jìn)GH的上升(P<0.05),而以Met+APS、Met+益生素、Arg+益生素效果最好,而Gln+APS、Gln+益生素、Met+益生素組極顯著抑制了SS的上升,同時(shí)Thr+APS、Arg+APS、Met+APS組也極顯著促進(jìn)了IGF-1的升高(P<0.01)。
(8)炎性細(xì)胞因子:應(yīng)激前,Gln或Arg+益生素均顯著促進(jìn)血液中
8、γ-干擾素(γ-IFN)的升高,而Met+APS或益生素的組合又顯著抑制γ-IFN的升高(P<0.05),而各組合均能顯著降低血液中白細(xì)胞介素1β(IL-1β)的含量,其中以Arg+APS或益生素、Gln+APS、Met+APS效果最好,而Thr+APS、Arg+APS或益生素等三組顯著促使仔豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)的升高;而應(yīng)激后,Met+APS或益生素組合均極顯著促進(jìn)γ-IFN的升高(P<0.01),除Thr組外,其余組對(duì)IL
9、-1β的上升有顯著影響(P<0.05),而Thr、Arg等組均極顯著抑制豬腫瘤壞死因子α的上升(P<0.01)。
結(jié)果說(shuō)明,各組合對(duì)豬生長(zhǎng)性能無(wú)顯著促進(jìn)作用,但Arg、Gln與APS、益生菌的互作對(duì)調(diào)節(jié)仔豬的免疫性能有顯著促進(jìn)作用,同時(shí)APS在調(diào)節(jié)機(jī)體體液免疫、抗應(yīng)激方面要顯著優(yōu)于益生菌。
第二部分:不同氨基酸與免疫增強(qiáng)劑的互作對(duì)保育豬小腸形態(tài)學(xué)發(fā)育及盲腸內(nèi)微生物的影響。
試驗(yàn)設(shè)計(jì)同第一部分。在試驗(yàn)結(jié)束后,
10、每組每重復(fù)選1頭健康豬只屠宰,采集十二指腸、空腸和回腸腸段、腸粘膜以及盲腸糞便等樣本,用于腸形態(tài)學(xué)、黏膜分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、微生物數(shù)量等指標(biāo)的檢測(cè)。結(jié)果表明:(1)不同氨基酸與黃芪多糖、益生菌的互作對(duì)十二指腸腸絨毛長(zhǎng)度、寬度及絨毛高度/隱窩深度有顯著影響(P<0.05),其中以Gln+APS、Gln或Arg+益生菌組對(duì)提高小腸絨毛長(zhǎng)度、寬度及絨毛高度/隱窩深度比值方面作用效果最強(qiáng);(2)各組合均能顯著促進(jìn)腸道 SIgA的分泌
11、,其中 Gln或 Thr或 Arg+益生素、Gln+APS等四組具有極顯著地促進(jìn)作用(P<0.01);(3)各組合均有抑制腸道大腸桿菌繁殖,促進(jìn)乳酸桿菌繁殖的作用趨勢(shì),其中Gln或Arg+益生素組效果顯著(P<0.05)。說(shuō)明谷氨酰胺、精氨酸與益生菌的互作對(duì)腸黏膜免疫系統(tǒng)的發(fā)育及其功能的完善具有全面顯著的促進(jìn)作用。
第三部分:不同氨基酸與免疫增強(qiáng)劑對(duì)保育豬豬瘟抗體水平及變化趨勢(shì)的影響研究。
設(shè)計(jì)同第一部分。根據(jù)豬場(chǎng)具
12、體免疫程序,28日齡時(shí),各個(gè)組首免豬瘟疫苗,首免前3天及首免后第7d、15d、22d(即試驗(yàn)豬25日齡、35日齡、42日齡、49日齡)時(shí),前腔靜脈采血,分離血清,用于豬瘟抗體檢測(cè)。結(jié)果表明:豬瘟首免前和免后前2周各處理組與對(duì)照組比差異均不顯著(P>0.05)。而在免后第3周(即49日齡),各處理組與對(duì)照組的差異有進(jìn)一步拉大的趨勢(shì),其中對(duì)于免前陽(yáng)性組(免疫前抗體呈陽(yáng)性),各添加組仔豬抗體阻斷值下降的速率有所減緩,而對(duì)于免前陰性組,Gln+
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