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文檔簡介
1、蜂膠是一種具有免疫增強(qiáng)作用的天然物質(zhì)。本文研究了不同極性溶劑,不同濃度乙醇,不同溫度對蜂膠提取率的影響并制備了蜂膠免疫佐劑。本文選用山東本地ND和EDS-76分離株,將其純化滅活后作為本試驗(yàn)抗原。將該抗原滅活后以一定比例與蜂膠佐劑按沈志強(qiáng)專有技術(shù)(know-how)制備雞ND-EDS76二聯(lián)蜂膠滅活疫苗。本文進(jìn)行了該疫苗攻毒試驗(yàn),測定了疫苗的最小免疫劑量、保護(hù)持續(xù)期、保存期。本文還進(jìn)行了疫苗的免疫效力試驗(yàn),并設(shè)有油佐劑組和空白對照組;該
2、試驗(yàn)中采用血凝和血凝抑制試驗(yàn)以及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)方法,對該疫苗免疫后雞只的體液免疫和細(xì)胞免疫水平進(jìn)行檢測。各試驗(yàn)結(jié)果如下: 1.不同極性溶劑提取蜂膠所得蜂膠總黃酮含量不同,隨著極性的升高,蜂膠總黃酮含量降低。根據(jù)溶劑的價格、食用安全性及回收率等因素,選擇乙醇作為提取蜂膠的溶劑。當(dāng)選擇乙醇作為提取蜂膠的溶劑時,隨著乙醇濃度的提高,上述有效成分的含量亦升高。溫度對蜂膠提取率的影響幅度不如濃度那么顯著,說明溫度不是影響蜂膠提取率的主要
3、因素。 2.本疫苗的攻毒試驗(yàn)結(jié)果顯示,疫苗安全系數(shù)達(dá)到100%,最小免疫劑量為0.3ml/只;一次免疫的保護(hù)持續(xù)期可長達(dá)6個月以上:保存期試驗(yàn)結(jié)果顯示,本疫苗在4℃~8℃保存1年后,保護(hù)率仍為100%,室溫保存6個月后,保護(hù)率在92%以上。 3.經(jīng)血凝和血凝抑制試驗(yàn)對該疫苗免疫后雞只的體液免疫水平的檢測發(fā)現(xiàn),相對于油佐劑疫苗,該疫苗免疫后產(chǎn)生抗體時間更早,滴度更高,持續(xù)時間更長;同時,經(jīng)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)結(jié)果得知,蜂膠組的
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