冠脈擴(kuò)張發(fā)病機(jī)制的研究.pdf

1、背景：隨著冠脈影像學(xué)技術(shù)的普及，冠脈擴(kuò)張（coronary artery ectasia，CAE）越來越多地被人們所認(rèn)識(shí)，其發(fā)病率低但絕對(duì)人數(shù)多，且有類似于冠心病的臨床表現(xiàn)，易于發(fā)生血栓事件，嚴(yán)重危害患者的健康和生命，然而目前缺乏對(duì)其針對(duì)性的治療措施，這主要是因?yàn)椴磺迤浯_切的病因和發(fā)病機(jī)制。對(duì)冠脈擴(kuò)張發(fā)病機(jī)制的深入研究，有助于科學(xué)地制定治療策略，從而緩解患者的臨床癥狀和改善長(zhǎng)期預(yù)后。
　　目的：因?yàn)楣诿}擴(kuò)張?zhí)卣餍圆±肀憩F(xiàn)為冠脈中層

2、細(xì)胞外基質(zhì)成分的嚴(yán)重?fù)p害，我們提出假設(shè):做為機(jī)體細(xì)胞外基質(zhì)降解的最終執(zhí)行者，蛋白酶可能在冠脈擴(kuò)張細(xì)胞外基質(zhì)的異常代謝過程中發(fā)揮著重要作用。本研究擬回答:1）冠脈擴(kuò)張細(xì)胞外基質(zhì)代謝的特點(diǎn)如何？2）蛋白酶是否和冠脈擴(kuò)張細(xì)胞外基質(zhì)的異常代謝相關(guān)？3）何種來源的蛋白酶參與了冠脈擴(kuò)張的病程？4）哪些內(nèi)源性物質(zhì)能夠調(diào)控這些酶的作用？本研究期待明確蛋白酶與冠脈擴(kuò)張的關(guān)系，為進(jìn)一步的研究提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：因?yàn)楣跔顒?dòng)脈管壁的主要細(xì)胞外基質(zhì)成

3、分是彈力纖維、Ⅰ和Ⅲ型膠原纖維，本研究首先在血清中檢測(cè)這些細(xì)胞外基質(zhì)合成和降解的生物標(biāo)志物，以初步評(píng)估冠脈擴(kuò)張患者細(xì)胞外基質(zhì)代謝的總體情況，同時(shí)也研究了其中某些指標(biāo)的臨床診斷價(jià)值。進(jìn)而檢測(cè)血液中總彈性蛋白酶和總金屬基質(zhì)蛋白酶的活性變化，分析他們與冠脈擴(kuò)張細(xì)胞外基質(zhì)代謝的相關(guān)性，在這個(gè)結(jié)果的指導(dǎo)下:1）進(jìn)一步對(duì)中性粒細(xì)胞來源的蛋白酶及其內(nèi)源性抑制物做了系統(tǒng)的研究;2）系統(tǒng)篩查了冠脈擴(kuò)張患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood

4、 mononuclear cells，PBMC)相關(guān)蛋白酶及其調(diào)控分子轉(zhuǎn)錄表達(dá)譜;3）利用冠脈擴(kuò)張混合血清模擬體內(nèi)的病理刺激，培養(yǎng)人臍靜脈平滑肌細(xì)胞，觀察其對(duì)蛋白酶表達(dá)和細(xì)胞外基質(zhì)代謝的影響，該部分還探討了細(xì)胞因子生長(zhǎng)分化因子15（growth differentiation factor15，GDF-15）的保護(hù)作用。
　　結(jié)果：通過對(duì)膠原代謝指標(biāo)系統(tǒng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn):冠脈擴(kuò)張患者彈性纖維降解增多，總膠原量減少，膠原極性由Ⅲ型為主向Ⅰ型

5、為主轉(zhuǎn)化。這些變化可能與冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張的形成，以及血管的硬化有密切的聯(lián)系。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，總彈性蛋白酶和總金屬質(zhì)蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)與彈力纖維降解密切相關(guān)。其中彈性纖維的降解產(chǎn)物——可溶性彈力蛋白(soluble elastin，sElastin)有助于冠脈擴(kuò)張的輔助診斷。在這個(gè)基礎(chǔ)上開展的試驗(yàn)顯示:1）冠脈擴(kuò)張組的中性粒細(xì)胞以一種未知的方式激活，釋放出中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(human neu

6、trophil elastase，HNE)和組織蛋白酶G(cathepsin G，CG)，同時(shí)內(nèi)源性蛋白酶抑制物相應(yīng)升高來限制它們的過度破壞作用，但這些蛋白酶抑制物同時(shí)也抑制了纖溶酶，影響了纖溶系統(tǒng)的功能，理論上增加了冠脈擴(kuò)張血栓事件的概率。2）系統(tǒng)篩查單個(gè)核細(xì)胞的蛋白酶及其調(diào)控體系的表達(dá)譜發(fā)現(xiàn)，單個(gè)核細(xì)胞來源的金屬基質(zhì)蛋白酶MMP1和MMP9，以及單個(gè)核細(xì)胞來源的細(xì)胞因子白細(xì)胞介素1α(interleukin-1A，IL1A)、血小板

7、衍化生長(zhǎng)因子B(Platelet-derived growth factor B，PDGF-B)、干擾素γ(Interferon gamma，IFNγ)和GDF15，可能都參與到冠脈擴(kuò)張的疾病進(jìn)程。3）冠脈擴(kuò)張混合血清能上調(diào)人臍靜脈平滑肌細(xì)胞MMP1的表達(dá)，加入GDF-15后這種上調(diào)高能夠被抑制，提示GDF-15是可能是一種內(nèi)源保護(hù)性因子。
　　結(jié)論：本研究以細(xì)胞外基質(zhì)代謝和蛋白酶解作用為中心開展了一系列的試驗(yàn)，進(jìn)一步證實(shí)冠脈擴(kuò)張