氧化苦參堿對2型糖尿病大鼠血管損傷的調(diào)控作用.pdf

1、研究背景和目的：2型糖尿?。―iabetes Mellitus，DM）已成為發(fā)病率日益增高的流行性代謝疾病，由它引發(fā)的各種心血管病并發(fā)癥對人類的身體健康造成嚴(yán)重的危害。慢性高血糖和高血脂引起的血管內(nèi)皮功能失調(diào)和損傷是導(dǎo)致心血管疾病的主要原因。糖尿病所致血管病變的早期癥狀包括內(nèi)皮依賴性血管舒張反應(yīng)的下降和血管內(nèi)皮炎癥反應(yīng)的激活。本項目觀察A2B受體激活對2型糖尿病大鼠血管損傷的可能作用及其機理，以及氧化苦參堿是否可作用于A2B受體對糖尿病

2、血管損傷產(chǎn)生保護效應(yīng)，為糖尿病及其心血管并發(fā)病變的防治提供新實驗基礎(chǔ)。
　　方法:采用高糖高脂喂養(yǎng)聯(lián)合小劑量 STZ注射誘導(dǎo)建立2型糖尿病大鼠模型。實驗動物隨機進行以下分組及處理：正常對照組（CONTROL），正常對照組+氧化苦參堿組（CON+OMT），糖尿病組（DM），糖尿病組+氧化苦參堿組(DM+OMT)，DM+OMT組和CON+OMT組以氧化苦參堿連續(xù)灌胃4周，CONTROL組和DM模型組給予等體積生理鹽水灌胃4周。實驗內(nèi)容

3、：1、測定各組大鼠的體重、血糖和血壓變化；2、測定各組大鼠胸主動脈離體血管環(huán)收縮舒張變化；3、應(yīng)用組織免疫熒光觀察各組大鼠胸主動脈中腺苷A2B受體的表達(dá)情況；4、采用實時熒光定量（qPCR）方法檢測各組大鼠胸主動脈中腺苷 A2B受體表達(dá)情況；5、應(yīng)用蛋白印跡檢測各組大鼠胸主動脈中腺苷A2B受體的表達(dá)情況，同時觀察 p38、ERK1/2和JNK的磷酸化程度；6、應(yīng)用酶聯(lián)免疫法檢測各組大鼠血清中白細(xì)胞介素1β、白細(xì)胞介素6和腫瘤壞死因子-α

4、的變化。
　　結(jié)果：1、糖尿病組大鼠的體重明顯低于正常組（p<0.05），血糖水平較正常組明顯升高（p<0.01），氧化苦參堿處理可以升高糖尿病大鼠體重（p<0.05），但不能顯著降低糖尿病大鼠持續(xù)增高的血糖水平（p>0.05）。2型糖尿病模型大鼠和正常組相比較，血管收縮壓和舒張壓出現(xiàn)明顯升高，提示血管收縮舒張功能出現(xiàn)明顯損傷，氧化苦參堿處理后能顯著改善(p<0.05)；2、大鼠胸主動脈離體血管環(huán)收縮舒張實驗結(jié)果表明：糖尿病組大鼠

5、胸主動脈離體血管環(huán)的收縮舒張功能和正常組相比顯著下降(p<0.05)，氧化苦參堿處理后能顯著改善恢復(fù)到正常。3、組織免疫熒光結(jié)果表明：糖尿病大鼠胸主動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞A2B受體的表達(dá)明顯升高，而氧化苦參堿處理后能夠降低胸主動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞A2B受體的表達(dá)。4、實時熒光定量（qPCR）結(jié)果表明：糖尿病大鼠胸主動脈血管A2B受體mRNA的表達(dá)明顯升高，而氧化苦參堿處理后能夠降低胸主動脈血管 A2B受體mRNA的表達(dá)(p<0.01)。5、蛋白印

6、跡結(jié)果同樣表明，糖尿病大鼠胸主動脈血管A2B受體蛋白的表達(dá)明顯升高，而氧化苦參堿處理后能夠降低胸主動脈血管A2B受體蛋白的表達(dá)(p<0.01)。另外，糖尿病大鼠胸主動脈血管蛋白的p38、ERK1/2和JNK的磷酸化程度明顯高于正常組(p<0.05)，而氧化苦參堿加糖尿病處理組的p38、ERK1/2和JNK的磷酸化程度明顯低于糖尿病組(p<0.05)。6、酶聯(lián)免疫法結(jié)果表明糖尿病大鼠血清中白細(xì)胞介素1β、白細(xì)胞介素6、腫瘤壞死因子-α和正