懷山藥的組織培養(yǎng)及其相關(guān)研究.pdf

1、本文第一章利用正交設(shè)計(jì)L<,9>(3<'4>)考察3種外源激素(IBA、NAA、6-BA)對(duì)懷山藥(Dioscorea opposite Thunb)不帶腋芽的節(jié)段的分化培養(yǎng)和植株再生的影響。IBA、NAA、6-BA的3個(gè)水平分別是0、0.4、0.8(mg/L，以下單位相同)，0.25、0.5、1.0，0.5、1.5、2.0。九個(gè)激素組合分別是：(1)2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA+0.8 mg/LIBA，(2)2.

2、0 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA+0.4 mg/LIBA，(3)2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA+0.8 mg/LIBA，(4)1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA+0.4 mg/LIBA，(5)1.5 mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA+0 mg/LIBA， (6)1.5 mg/L 6-BA+0.25mg/LNAA+0.8 mg/LIBA，(7)0.5 mg/L 6-BA+1.0 m

3、g/LNAA+0mg/LIBA，(8)0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA+0.8 mg/LIBA，(9)0.5 mg/L 6-BA+0.25 mg/LNAA+0.4 mg/LIBA.通過(guò)本試驗(yàn)得到適合懷山藥不帶腋芽的節(jié)段分化培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基：改良MS+100g/L香蕉+0.5mg/L6-BA+1.0mg/LNAA+0.5％瓊脂+0.5％活性炭+3％蔗糖。壯苗培養(yǎng)基為：改良MS+100g/L香蕉+0.5mg/LNAA+O.

4、5％瓊脂+0.5％活性炭+3％蔗糖。在轉(zhuǎn)入生根壯苗培養(yǎng)基20天～30天，無(wú)菌苗形成圓形微型塊莖(Microtuberization)，60天時(shí)形成率為100％，直徑約為5mm～12mm，形成數(shù)量較多(一株可形成1～3個(gè)，且形成一個(gè)的較少)。在本文中，首次對(duì)無(wú)菌苗的葉柄。、莖段和根塊在6-BA、NAA、IBA的不同濃度組合下直接分化成苗進(jìn)行了探討，選出的最適合這三種外植體直接分化成苗途徑的激素組合分別是：最適無(wú)菌根塊分化培養(yǎng)基是，改良的M

5、S+100g/L香蕉+0.5 mg/L 6-BA+0.25 mg/L NAA+0.4mg/L IBA+0.5％瓊脂+0.5％活性炭+3％蔗糖；最適無(wú)菌莖段分化的培養(yǎng)基是，改良MS+100g/L香蕉+0.5 mg/L6-BA+0.5mg/L NAA+0.8mg/L IBA+0.5％瓊脂+0.5％活性炭+3％蔗糖；最適無(wú)菌葉柄分化的培養(yǎng)基是，改良MS+100g/L香蕉+1.5/L 6-BA+0.25 mg/L NAA+0.5％瓊脂+0.5％

6、活性炭+3％蔗糖。通過(guò)試驗(yàn)首次實(shí)現(xiàn)葉柄和根塊直接分化成苗，并且使莖段和根塊的分化率達(dá)到了100％，并證明，無(wú)菌根塊是研究懷山藥直接分化成苗的一個(gè)良好的培養(yǎng)系統(tǒng)。 在本文的第三章采用火焰原子吸收法測(cè)定了山藥組培微塊莖和培養(yǎng)前后培養(yǎng)基中的K、Cu、 Fe、Mn、Zn五種金屬元素的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，除Cu外，其余四種元素的含量均高于相關(guān)報(bào)道文獻(xiàn)數(shù)倍甚至數(shù)十倍(已有文獻(xiàn)報(bào)道的山藥成品中的鉀2563～7147mg/L、鋅2.4～7.2

7、mg/L、鐵5.7～24 mg/L、錳0.3～3.8 mg/L、銅0.9～3.2 mg/L，而本試驗(yàn)測(cè)得的各金屬元素的含量是鉀132182.27 mg/L，鐵126.43 mg/L，銅1.23 mg/L，鋅31.06 mg/L，錳69.51 mg/L)，這也說(shuō)明在組培條件下形成的微型塊莖對(duì)金屬元素的富積能力高于在自然生長(zhǎng)條件下。培養(yǎng)基在培養(yǎng)前后，除Mn消耗明顯外，其余元素?zé)o明顯變化。 在樣品的消解方法上，本試驗(yàn)提出了新的較為方便