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文檔簡介
1、目的:
香煙燃燒產(chǎn)物中含有多種致突變物和致癌物,可以對人體產(chǎn)生嚴(yán)重的遺傳損傷,本實(shí)驗(yàn)通過提取香煙燃燒產(chǎn)物制作香煙煙霧提取物,并用它刺激肺泡上皮細(xì)胞,觀察香煙對肺泡上皮細(xì)胞的DNA損傷,初步探討香煙導(dǎo)致肺泡上皮細(xì)胞遺傳損傷。
方法:
培養(yǎng)人肺泡上皮細(xì)胞A549,以二甲基亞砜(DMSO)作為溶劑制取香煙煙氣提取物(cigarette smoke extract,CSE),將不同濃度的CSE作用于A5
2、49細(xì)胞,用MTT法測定細(xì)胞活性,檢測DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)率(DNA-protein crosslinks,DPC)及彗星實(shí)驗(yàn)觀察DNA損傷,同時(shí)檢測超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)觀察CSE對肺泡細(xì)胞的氧化損傷作用。
結(jié)果:
1.10%、2096、50%CSE作用組與對照組相比細(xì)胞活性無明顯差異,(P>0.05)活性無明顯影響,而100%CSE組的細(xì)胞活性則明顯下
3、降且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
2.CSE各濃度組與空白對照組及溶劑組相比,尾部DNA含量,尾長,尾距,Olive尾距均明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),20%CSE及以上濃度組均表現(xiàn)DPC增高,兩指標(biāo)均有劑量效應(yīng)關(guān)系。
3.20%CSE及以上劑量組的SOD、GSH-PX與對照組相比明顯下降,MDA則上升,(P<0.05),有一定的劑量效應(yīng)關(guān)系。
4.DPC與抗氧化指標(biāo)之間存在
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