四川漢族和彝族家系KIR單體型研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分,四川漢族何彝族家系KIR單體型研究
   目的:
   通過家系分析,了解四川漢族和彝族家系KIR單體型的基因組成情況。
   方法:
   采集21個四川漢族家系口腔粘膜標本,89個四川彝族家系EDTA抗凝靜脈血標本,提取基因組DNA。用多重PCR-SSP的方法對16個KIR基因位點進行基因分型,并分別測定了3DP1和2DS4的2組亞型。根據(jù)KIR基因型結合家系分析推導KIR單體型。對部分樣本

2、中某些不能確定拷貝數(shù)的KIR基因,進行熒光定量PCR分析,測定該KIR基因的相對拷貝數(shù),再結合家系分析,得到其KIR單體型。
   結果:
   21個四川漢族家系中共發(fā)現(xiàn)13種KIR基因型,12種KIR單體型,其中有2種A單體型,10種B單體型。四川漢族家系中基因型1、3、4、5有3種單體型組合方式,基因型2、8、68有2種單體型組合方式,基因型6、7、9、69、72、75分別只有1種組合方式。89個四川彝族家系中發(fā)現(xiàn)

3、22種KIR基因型,21種單體型,其中A單體型有3種,B單體型有18種;KIR基因型的單體型組合方式:基因型3、4、5各有5種,基因型1、7、68有4種,基因型6、9、70、188各有3種,基因型2、8各有2種,其余基因型各有1種單體型組合方式。四川漢族和彝族有12種相同的基因型,9種相同的單體型。在四川彝族家系中發(fā)現(xiàn)了2種較為獨特的單體型,1種是含有3DP1變異體的A單體型,1種是缺失結構基因3DP1的B單體型。從所得到的單體型的結構

4、上看,除了缺失了3DP1的單體型以外,其余單體型的著絲粒端由KIR3DL3、2DS2、2DL2、2DL3、2DP1、2DL1和3DP1組成,并按從頭到尾的順序排列組合成了4種基本模式:3DL3-2DL3-2DP1-2DL1-3DP1,3DL3-2DS2-2DL2-3DP1v,3DL3-2DL3-3DP1v,3DL3-2DS2-2DL2-2DP1-2DL1-3DP1,而單體型的端粒端則由于可含有多種激活性KIR基因,而具有更加豐富的結構模

5、式。
   結論:
   通過對四川漢族和彝族家系KIR單體型的分析,我們發(fā)現(xiàn)四川漢族和彝族家系的KIR單體型與白種人通過家系分析得到的KIR單體型不僅存在種類上的差異,且同一KIR基因型的KIR單體型組合方式也有所不同,在四川人群KIR單體型分析中,以四川人群家系分析獲得的KIR單體型數(shù)據(jù)為基礎推導更為準確。四川漢族和彝族家系KIR單體型基因組成具有以下規(guī)律:1)2DL1、2DP1總是和3DP1同時出現(xiàn),2)有2DS1

6、時則2DS4缺失,反之亦然,3)2DS2總是和2DL2同時出現(xiàn)。熒光定量PCR技術可以定量測定個體攜帶的KIR基因的相對拷貝數(shù),對于家系分析KIR單體型是一有益補充。
   第二部分,四川漢族人民KIR及其HLA配體的相互關系研究
   目的:
   了解殺傷細胞免疫球蛋白樣受體(KIR)及其HLA配體在四川漢族人群中的基因頻率分布和配對情況,探討KIR和HLA的相互關系。
   方法:
   隨

7、機選擇從2008年12月到2009年10月間四川骨髓庫漢族街頭無關捐獻者標本286份,采用聚合酶鏈式反應-序列特異性引物擴增(PCR-SSP)進行KIR基因分型;采用聚合酶鏈式反應.直接測序分型法(PCR-SBT)進行HLA-A、B、C等位基因的測序分型。
   結果:
   在四川骨髓庫漢族人群中,所有個體均具有結構基因3DL2、3DL3、2DL4和3DP1;共發(fā)現(xiàn)29種KIR基因型,其中基因型ID1和ID2頻率最高

8、,分別為47.55%(136/286)和14.69%(42/286)。HLA-C1和HLA-C2在該人群中的頻率分別為85.15%(487/572)和14.85%(85/572);HLA-BBw4的頻率為31.99%(183/572),HLA-ABw4的頻率是20.78%(119/572)。在該人群中,所有個體均含有抑制性KIR/HLA-C配受體對,含有1對、2對和3對配受體對的頻率分別是77.27%(211/286),15.04%(4

9、3/286),7.69%(22/286)。在KIR/HLA-Bw4配受體對中,僅含有3DL1+HLA-Bw4的頻率為44.76%(128/286),僅含有3DS1+HLA-Bw4的頻率為2.80%(8/286),同時含有3DL1+HLA-Bw4和3DS1+HLA-Bw4的配受體對的頻率為25.17%(72/286),另外有27.27%(78/286)的個體無KIR/HLA-Bw4配受體對。
   結論:
   四川骨髓庫

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