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文檔簡介
1、白蘿卜(Raphanussativus L.)又稱萊菔,是中草藥中具有明確促胃腸動力的單味中藥,被廣泛用于“食積脹滿”、“反胃吐食”的治療。白蘿卜作為藥源性食物已經(jīng)應用久遠,但是在其促進胃腸動力方面機制的研究不夠完善。白蘿卜本身是可食用并無明顯毒副作用的中藥,如果能夠闡述清楚其作用機制,進而從中提取到可以用于臨床且作用效果明確的促胃腸動力有效成分,則不僅可以回避促胃腸動力西藥的毒副作用,而且還具有重要的臨床實用價值和巨大的社會、經(jīng)濟學效
2、益。本課題在既往本實驗室實驗證實白蘿卜粗提物(Thecrudeextract of raphanus,Ecr)促胃腸動力的作用,且確定其最佳作用劑量為1ml/kg基礎上,應用電生理學、免疫組織化學熒光雙重標記以及電子顯微鏡等實驗方法,研究Ecr對胃電起搏區(qū)Cajal間質細胞(Interstitial cells of cajal,ICCs)的活化作用及與Cajal間質細胞產(chǎn)生的慢波傳遞作用密切相關的縫隙連接蛋白43(Connexin43
3、,Cx43)和細胞間連接反應變化、小腸消化間期移行性復合肌電(Interdigestive Myoelectric Complex,IMC)及與ICCs相關興奮性胃腸激素P物質(Subtance P,SP)等變化情況,探討Ecr促胃腸動力的作用機制。旨在為開發(fā)出具有知識產(chǎn)權的促動力中藥提供可靠的理論基礎。
方法:①采用免疫組化熒光雙重標記ICCs與SP、ICCs與Cx43的方法,觀察Ecr作用對與ICCs密切關系的興奮性胃腸激
4、素SP及縫隙連接蛋白Cx43的影響;②采用電生理學方法觀察Ecr對大鼠小腸IMC周期、活動期與周期的比值及活動期的快波數(shù)目的影響;③采用透射電子顯微鏡的方法觀察Ecr作用后ICCs超微結構的特點及ENS神經(jīng)末梢-ICCs-SMC三者細胞間連接等關系特點。
結果:①Ecr能增加肌間神經(jīng)叢和肌內SP及與ICCs結合的SP的表達,而對黏膜層和黏膜下層SP的表達無明顯影響;②Ecr能增加肌間神經(jīng)叢和肌層Cx43的表達,及與ICCs結合
5、的Cx43的表達;③Ecr能促進小腸IMC活動期的快波節(jié)律,縮短IMC周期,及增加活動期占整個周期的比值;④電子顯微鏡研究也證實ICCs有豐富的線粒體和滑面內質網(wǎng),ICCs與神經(jīng)末梢密切聯(lián)系,與SMC形成縫隙連接。并且發(fā)現(xiàn)ICCs與SMC之間一種特殊的細胞間密切連接的方式。
結論:Ecr促進胃腸動力的外周機制可能是通過促進ICCs的電活動、促進與ICCs密切相關的興奮性神經(jīng)遞質SP的表達和促進ICCs與相鄰ICCs及SMC之間
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