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文檔簡介
1、中草藥預防和治療乳腺癌越來越受到重視,其中異黃酮類防治乳腺癌的作用倍受關(guān)注?;苯且蚋缓苯擒铡⑷玖夏拒?、染料木素等異黃酮植物雌激素,具有抗腫瘤活性。本論文主要研究槐角及其生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物對人乳腺癌細胞的增殖凋亡的影響,為乳腺癌的防治提供依據(jù)。
研究方法:分別以槐角及其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物處理對數(shù)生長期的人乳腺癌MCF-7(ER+)、MDA-MB-231(ER-)細胞株,應用MTT 法檢測藥品對細胞的增殖影響;通過形態(tài)學觀察、DNAladd
2、er、免疫印跡、PI 單染等不同方法研究藥品對MCF-7細胞的增殖影響及初步機制。
首先研究了槐角及其轉(zhuǎn)化物對人乳腺癌細胞的增殖影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),槐角及其轉(zhuǎn)化2天產(chǎn)物不影響MCF-7細胞的增殖,轉(zhuǎn)化16天產(chǎn)物作用72 h后顯著抑制其增殖;槐角及其轉(zhuǎn)化物促進MDA-MB-231細胞增殖且隨著作用時間的延長促增殖作用增強。
其次分別研究了槐角及其轉(zhuǎn)化物的多糖、異黃酮粗提物對人乳腺癌細胞的增殖影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),槐角轉(zhuǎn)化
3、2天、16天粗提物異黃酮作用MCF-7細胞顯著抑制其增殖,未轉(zhuǎn)化的槐角中的異黃酮影響不顯著;槐角轉(zhuǎn)化前后提取的異黃酮粗提物均促進MDA-MB-231細胞的增殖?;苯寝D(zhuǎn)化前后提取的粗多糖不影響MCF-7細胞的增殖;而顯著促進MDA-MB-231(ER-)細胞的增殖。
最后研究了槐角轉(zhuǎn)化2天提取產(chǎn)物染料木素、16天提取產(chǎn)物異櫻黃素對人乳腺癌細胞增殖、凋亡的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),染料木素和異櫻黃素顯著抑制MCF-7細胞增殖,而不影響M
4、DA-MB-231細胞的增殖;異櫻黃素引起典型的MCF-7 凋亡細胞形態(tài)學變化;未發(fā)現(xiàn)染料木素、異櫻黃素作用細胞的DNA斷裂的梯狀條帶;Western blotting結(jié)果顯示染料木素、異櫻黃素作用MCF-7細胞24、48、72 h 均活化caspase-3 并切割其底物PARP,長時間作用于MDA-MB-231細胞活化caspase-3 但不切割底物PARP;PI 單染流式檢測顯示,異櫻黃素作用MCF-7細胞72 h 促凋亡,凋亡率為
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