兩株生防細(xì)菌對蔬菜枯萎病的防治效果及其抗菌物質(zhì)的研究.pdf

1、蔬菜是關(guān)系人類健康狀況的重要食物之一，蔬菜病害的生物防治是提高蔬菜產(chǎn)量和品質(zhì)的有效途徑。本研究采用室內(nèi)平板對峙培養(yǎng)和盆栽試驗相結(jié)合的方法，研究多粘類芽孢桿菌 BRF-1和枯草芽孢桿菌BRF-2對黃瓜和番茄枯萎病的防治效果；應(yīng)用硫酸銨分級沉淀和有機溶劑固體浸提等方法分別對兩株生防菌的抗菌物質(zhì)進行分離提?。徊捎肞CR-DGGE分子生物學(xué)方法，研究不同采樣時期兩株生防菌對兩種蔬菜根際微生物群落結(jié)構(gòu)的影響。 試驗結(jié)果表明，兩株生防細(xì)菌不

2、同稀釋倍數(shù)的代謝產(chǎn)物對3種蔬菜病害病原真菌分生孢子萌發(fā)和4種病原菌菌絲生長均具有抑制作用。當(dāng)兩菌株代謝產(chǎn)物稀釋5倍時，對分生孢子萌發(fā)的抑制率達到80％以上；兩菌株代謝產(chǎn)物在稀釋2倍和5倍時，對4種病原真菌菌絲生長的抑制率在40％～80％之間，與對照相比差異極顯著(P<0.01)。盆栽試驗表明，BRF-1和BRF-2生防細(xì)菌菌懸液及其無菌代謝產(chǎn)物對黃瓜和番茄枯萎病不僅具有較好的防治效果，而且具有明顯的促進生長作用。 通過硫酸銨分級

3、沉淀、Sephadex G-50柱層析并采用抑菌活性和SDS-PAGE跟蹤檢測，從多粘類芽孢桿菌BRF-1菌株代謝產(chǎn)物中分離純化到一種對大豆立枯絲核菌具有拮抗活性的抗菌蛋白，分子量約35.4 kDa。用乙醇、甲醇有機溶劑和水對BRF-2代謝產(chǎn)物進行固體浸提，抑菌圈半徑分別為17.0 mm，13.5 mm，9.5 mm，其中乙醇提取的活性物質(zhì)通過氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀進行初步鑒定，結(jié)果表明拮抗活性物質(zhì)的主要成分為含有羧基的酯類物質(zhì)。

4、采用PCR—DGGE技術(shù)，研究接種生防菌BFR-1和BRF-2對黃瓜和番茄不同時期根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果表明，兩株生防菌對兩種蔬菜根際細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)影響不明顯，作物種類和取樣時期是決定根際細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)變化的主導(dǎo)因素，生防菌的作用處于次要地位。而對兩種蔬菜根際真菌群落結(jié)構(gòu)的研究表明，番茄根際真菌群落結(jié)構(gòu)受生防菌處理的影響較采樣時期的影響大，黃瓜根際真菌群落結(jié)構(gòu)受處理和時期影響都不明顯。因此，真菌群落結(jié)構(gòu)受生防菌影響的大小因作物種