廣譜生防細(xì)菌的篩選及其抗菌物質(zhì)的分離.pdf

1、1.生防細(xì)菌的分離篩選從所采集土樣中分離純化出的501株細(xì)菌中，篩選出對(duì)16株病原真菌抑制力均最強(qiáng)的I7、M22BH3作為目標(biāo)生防菌。I7分離自甘肅省蘭州市安寧區(qū)茄子地的土壤中，M22BH3分離自甘肅省蘭州市范家坪百合地的土壤中。生防菌I7、M22BH3對(duì)16株病原真菌均表現(xiàn)出顯著的抑制作用，拮抗帶直徑最高分別達(dá)37.2mm和36.9mm。它們的無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)液對(duì)16株病原真菌也均具有明顯的抑制作用，其原液對(duì)病原真菌的抑制率分別高達(dá)82.6

2、％和83.3％。 2.生防細(xì)菌I7、M22H3的系統(tǒng)發(fā)育分析通過(guò)形態(tài)觀察、環(huán)境因素影響的測(cè)定、生長(zhǎng)特征、生理生化指標(biāo)測(cè)定、16SrRNA寡核苷酸序列分析以及DNA的(G+C)mol％值測(cè)定，確定生防菌I7是一株新的解淀粉芽孢桿菌，保藏于CCTCC，保藏名BacillusamyloliquefaciensI7，保藏號(hào)M206027；生防菌M22BH3是一株新的枯草芽孢桿菌，保藏于CCTCC，保藏名BacillussubtilisM

3、22BH3，保藏號(hào)M206028?，F(xiàn)己對(duì)這兩株生防菌向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局申請(qǐng)了專利，專利申請(qǐng)?zhí)柗謩e為200610200364X和2006102003654。 3.抗菌物質(zhì)的分離與性質(zhì)研究研究發(fā)現(xiàn)，生防菌I7、M22BH3的無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)液具有較好的熱穩(wěn)定性：121℃處理20min后，I7的無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)液仍可保持75％的抑菌活性；M22BH3的無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)液仍可保持71.4％的抑菌活性，且對(duì)蛋白酶K和胰蛋白酶都不敏感。通過(guò)(NH4)2SO4分