北五味子莖藤化學(xué)成分及抗肝癌細(xì)胞作用研究.pdf

1、北五味子為木蘭科植物五味子[Schisandra chinensis(Turcz) Bail1]及華中五味子(Schisandra sphenanthera Rehd.et Wi l s)的干燥成熟果實(shí)。本草中均列為上品，認(rèn)為有益氣、明目、補(bǔ)不足、養(yǎng)五臟、壯筋骨等作用。中醫(yī)作為收斂、滋補(bǔ)強(qiáng)壯藥使用。
　　藥物化學(xué)研究表明，北五味子莖藤主要含有揮發(fā)油、木脂素類、香豆素類、甾醇類、單糖與多糖類化學(xué)成分。五味子果實(shí)中含有檸檬酸、蘋果酸、

2、酒石酸等多種有機(jī)酸，還含有脂肪油、氨基酸、色素、鞣質(zhì)等。近年來對(duì)北五味子果實(shí)研究頗多，但對(duì)其莖藤研究較少，所以本課題就其莖藤進(jìn)行研究。
　　本實(shí)驗(yàn)首先對(duì)北五味子莖藤干燥的藥材粉末應(yīng)用CO2超臨界萃取，并應(yīng)用GC-MS技術(shù)分析鑒定揮發(fā)油化學(xué)成分；剩余藥材用95％乙醇提取，醇提取部分分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，然后將CO2超臨界萃取物和醇提后的各萃取物進(jìn)行進(jìn)一步分離，并確定所得到單體化合物的結(jié)構(gòu)，對(duì)不同溶劑萃取物以及分離得到的

3、單體化合物進(jìn)行體外抗肝癌細(xì)胞抑制實(shí)驗(yàn)。醇提取后的藥材曬干，再用水提取，得到北五味子莖藤多糖，采用苯酚-硫酸法測(cè)定多糖的含量。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：(一)用GC-MS聯(lián)用技術(shù)分析從超臨界CO2萃取中得到的北五味子莖藤揮發(fā)油組分，并從北五味子莖藤中分析鑒定出北五味子醇甲等19種化學(xué)成分。超臨界CO2萃取物為黃綠色油狀物，得率為3.22%。(二)采用反復(fù)硅膠柱層析對(duì) CO2超臨界萃取物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物進(jìn)行進(jìn)一步

4、的分離，共得到17個(gè)單體化合物。據(jù)理化性質(zhì)、以及1H-NMR、13C-NMR、MS等波譜數(shù)據(jù)分析鑒定了其結(jié)構(gòu)，它們分別是：五味子丙素(Ⅰ)，環(huán)阿爾廷酮(Ⅱ)，十九醇(Ⅲ)，齊墩果-12-烯-3-羰基-23-甲酸甲酯(Ⅳ)，三十五醇(Ⅴ)，二十四醇(Ⅵ)，戈米辛 N(Ⅶ)，β-谷甾醇(Ⅷ)，五味子乙素(Ⅸ)，齊墩果-12-烯-3-乙酸酯(Ⅹ)，五味子醇乙(Ⅺ)，南五味子酸(Ⅻ)，三十三醇(ⅩⅢ)，胡蘿卜苷(ⅩⅣ)，1（2），6（7）-二烯

5、-5，8-二酮(ⅩⅤ)，其中化合物ⅩⅥ,ⅩⅦ結(jié)構(gòu)尚未鑒定。(三)不同萃取物體外抗肝癌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：北五味子莖藤石油醚萃取物有明顯的抗肝癌細(xì)胞抑制作用，乙酸乙酯和正丁醇萃取物有微弱的抗肝癌細(xì)胞抑制作用。(四)單體體外抗肝癌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：?jiǎn)误w化合物Ⅰ，Ⅲ，Ⅴ，Ⅵ，Ⅷ，Ⅸ，Ⅺ均有明顯的抗肝癌細(xì)胞抑制作用，其中化合物Ⅰ，Ⅷ，Ⅸ抗肝癌細(xì)胞抑制作用顯著。(五)水提取北五味子莖藤中多糖，采用苯酚-硫酸法測(cè)定多糖的含量，含量為6.36%，北五味