幼鼠內(nèi)臟痛高敏感性與結(jié)腸及中樞神經(jīng)系統(tǒng)CGRP表達(dá)的關(guān)系.pdf

1、目的：建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，通過檢測(cè)幼鼠結(jié)腸、腰骶段脊髓背角和不同腦區(qū)(下丘腦室旁核、中縫核和前皮質(zhì)扣帶回)CGRP分布和表達(dá)情況，探討腦-腸軸中CGRP異常表達(dá)在幼鼠內(nèi)臟高敏感形成中的作用，深入認(rèn)識(shí)小兒腹痛相關(guān)的功能性胃腸道疾病的病理生理機(jī)制，為臨床采取有效防治措施和開發(fā)治療藥物提供理論依據(jù)。 方法：32只SD乳鼠按析因設(shè)計(jì)分成4組，每組8只，A1B1組：新生期予結(jié)直腸刺激(Colorectal lrritation，CD

2、，6周齡時(shí)予結(jié)直腸擴(kuò)張(Colorectal Distension，CRD)刺激；A1B2組：新生期予CI，6周齡時(shí)不予CRD刺激；A2B1組：新生期未接受CI，6周齡時(shí)予CRD刺激；A2B2組：新生未接受CI，6周齡時(shí)也未予CRD刺激。A1B1組和A1B2組乳鼠從出生第8天開始每天固定時(shí)間接受CI，每日1次，連續(xù)7d；A2B1組和A2B2組只與母鼠分離、捉拿而不行CI。隨后將乳鼠常規(guī)飼養(yǎng)至6周齡進(jìn)行下列研究：①CRD刺激下腹壁撤退反射

3、(AWR)評(píng)分、痛閾測(cè)定和腹外斜肌放電波幅檢測(cè)評(píng)價(jià)幼鼠內(nèi)臟痛敏感性。②對(duì)結(jié)腸、L6～S2脊髓和不同腦區(qū)(下丘腦室旁核、中縫核和前皮質(zhì)扣帶回)進(jìn)行CGRP免疫組化法染色，采用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行CGRP陽性細(xì)胞數(shù)和灰度積分值半定量分析。③降結(jié)腸病理學(xué)檢查。α=0.05為顯著性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果：[1]幼鼠6周齡時(shí)，隨CRD增加，A1B1組和A2B1組幼鼠AWR評(píng)分和腹外斜肌放電波幅均逐漸增加；CRD20mmHg、40mmHg、60

4、mmHg時(shí)，A1B1組AWR評(píng)分明顯高于A2B1組，CRD80mmHg時(shí)，兩組AWR評(píng)分無顯著差異；CRD15mmHg、30mmHg、45mmHg時(shí)，A1B1組腹外斜肌放電幅值明顯高于A2B1組，CRD60mmHg、75mmHg時(shí)，兩組腹外斜肌放電幅值無顯著差異；A1B1組和A2B1組大鼠痛閾值分別為14.79±3.14mmHg、37.71±5.3mmHg，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=109.4，P<0.01)；降結(jié)腸未見明顯病理組織損傷。[

5、2]新生期CI和接受傷害性CRD刺激后可導(dǎo)致幼鼠結(jié)腸、脊髓背角和下丘腦室旁核、前扣帶回皮質(zhì)、中縫核內(nèi)CGRP陽性細(xì)胞數(shù)明顯增加，CGRP陽性細(xì)胞灰度積分值明顯降低。 結(jié)論：新生期持續(xù)CI會(huì)造成幼鼠痛閾下降，出現(xiàn)慢性內(nèi)臟高敏感性，且沒有明確的組織病理學(xué)改變；幼鼠慢性內(nèi)臟痛敏感性異?？赡軤可婺X-腸軸的各個(gè)環(huán)節(jié)，無論是外周結(jié)腸，還是脊髓背角和前皮質(zhì)扣帶回、下丘腦室旁核、中縫核，CGRP均參與了內(nèi)臟痛敏感性變化：新生期CI可導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)