墨蘭組培體系的優(yōu)化及根狀莖在生物反應(yīng)器內(nèi)培養(yǎng)的研究.pdf

1、墨蘭是一種極具觀賞價(jià)值的高檔蘭花，但因其繁殖系數(shù)低，規(guī)?；a(chǎn)受到阻礙，組織培養(yǎng)是解決這一問(wèn)題的重要途徑。本研究為了建立墨蘭組培快繁體系，以墨蘭根狀莖為外植體，調(diào)查了影響墨蘭根狀莖增殖，芽分化和生根的若干因素；此外，利用氣升式生物反應(yīng)器影響根狀莖增殖培養(yǎng)的幾種理化參數(shù)進(jìn)行了研究，為墨蘭種苗的規(guī)?；a(chǎn)提供理論依據(jù)。
　　通過(guò)研究影響墨蘭根狀莖增殖的因素，本研究結(jié)果表明當(dāng)花寶一號(hào)（H1）和花寶二號(hào)（H2）單獨(dú)使用時(shí)，墨蘭根狀莖的生長(zhǎng)

2、及增殖效果不及MS培養(yǎng)基，但當(dāng)H1和H2混合使用（H12）時(shí)明顯好于MS培養(yǎng)基。BA和NAA的混合使用有利于根狀莖的增殖生長(zhǎng)，當(dāng)H12培養(yǎng)基中加入BA2 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1時(shí)，根狀莖分化數(shù)多且鮮重和干重良好；糖種類對(duì)根狀莖增殖生長(zhǎng)影響較大，在H12+BA2 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1培養(yǎng)基中加入30 g·L-1的蔗糖或食用白糖時(shí)增殖效果最佳，其次是葡萄糖，果糖不利于根狀莖增殖培養(yǎng)，因根狀莖增殖在蔗糖和

3、食用白糖無(wú)明顯差異，所以可用白糖代替蔗糖。
　　為了從組培根狀莖中誘導(dǎo)綠芽，本文對(duì)BA和NAA濃度的影響進(jìn)行了研究，NAA0.2 mg·L-1和BA4 mg·L-1＋食用白糖30 g·L-1＋瓊脂7.0 g·L-1的培養(yǎng)基中芽分化數(shù)最多，生長(zhǎng)狀態(tài)最好。此外，研究墨蘭試管苗適宜生根的培養(yǎng)基，結(jié)果發(fā)現(xiàn)H12培養(yǎng)基中加入NAA1.0 mg?L-1可促進(jìn)試管苗生根。
　　利用氣升式生物反應(yīng)器可大量增殖墨蘭根狀莖，其增殖效果顯著好于固

4、態(tài)培養(yǎng)基培養(yǎng)和液態(tài)培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)。墨蘭根狀莖在完全浸沒(méi)式反應(yīng)器中增殖效果好于接觸式反應(yīng)器培養(yǎng)，在3 L反應(yīng)器中接種15 g根狀莖進(jìn)行完全浸沒(méi)培養(yǎng)45 d后，根狀莖鮮重可達(dá)145.5 g，增殖系數(shù)為8.7，顯著好于10 g和20 g接種量處理；活性炭濃度為0.3 g·L-1時(shí)，其根狀莖鮮重和增殖系數(shù)均顯著優(yōu)于其它處理，分別為151.2 g和9.08；0.10 vvm是促進(jìn)墨蘭根狀莖增殖的最適宜通氣量，過(guò)高或過(guò)低都不利于根狀莖的增殖生長(zhǎng)；光