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文檔簡介
1、目的:本課題在中醫(yī)“形勞、神勞”理論指導(dǎo)下,通過心理和軀體的復(fù)合應(yīng)激因素,研制與慢性疲勞綜合征(Chronicfatiguesyndrome,CFS)臨床表現(xiàn)近似的孕前SD雌性大鼠動物模型,通過與健康雄性SD大鼠合籠,觀察孕前CFS對仔鼠生長發(fā)育和學(xué)習(xí)記憶及下丘腦-垂體-甲狀腺軸(HPT軸)激素水平的影響。方法:選用清潔級健康雌性SD大鼠60只,雄性SD大鼠22只;雌性大鼠隨機(jī)分為2組,即正常組和模型組,正常組30只,模型組30只。正常
2、組雌鼠和雄性大鼠不給予任何刺激,模型組大鼠給予以下3種刺激(束縛:束縛筒每天束縛180min,束縛期間禁食禁水;游泳:前3d為適應(yīng)性游泳30min,以后為100min;夾尾:每天夾尾1min),連續(xù)5w。造模結(jié)束后,正常組和模型組每組隨機(jī)選取8只大鼠進(jìn)行曠場實驗、冷水力竭游泳實驗、Morris水迷宮實驗以檢測模型組動物的孕前CFS狀態(tài)。測試結(jié)束后第2d麻醉取血,用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清促甲狀腺激素釋放激素(TRH)、促甲狀
3、腺激素(TSH)、三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)含量。正常組22只雌鼠和模型組22只雌鼠按2:1與雄性大鼠合籠5d。孕鼠自然分娩后,觀察仔鼠出生情況,兩組中各隨機(jī)選取8窩仔鼠(正常組87只,模型組84只)每周體尺測量至4w,第30d正常組和模型組每組隨機(jī)選12窩,每窩隨機(jī)選取1只做曠場實驗和Morris水迷宮實驗。水迷宮實驗結(jié)束后第2d將上述每組隨機(jī)選取的12只仔鼠處死,測定血清TRH、TSH、T3和T4激素水平。
4、> 結(jié)果:①模型組雌鼠在造模后曠場實驗爬行格數(shù)和直立次數(shù)與正常組相比有顯著差異(P<0.05);冷水力竭游泳時間與正常組對比有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);Morris水迷宮定位航行試驗與正常組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),空間搜索試驗與正常組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05);血清TRH、TSH含量與正常組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05);T3含量明顯降低,與正常組相比有極顯著性差異(P<0.01);T4含量與正常組相比無顯著
5、性差異(P>0.05)。②模型組仔鼠平均體重、身長、尾長與正常組仔鼠相比具有極顯著性差異(P<0.01);曠場實驗?zāi)P徒M仔鼠爬行格數(shù)較少,與正常組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);直立次數(shù)減少,但與正常組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05);Morris水迷宮定位航行試驗與正常組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),空間搜索試驗與正常組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);血清TSH、TRH含量與正常組仔鼠相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。T
6、3含量明顯降低,與正常組相比有極顯著性差異(P<0.01),T4水平較正常組低,具有顯著性差異(P<0.05)。
結(jié)論:①CFS大鼠的水平活動、探究能力和學(xué)習(xí)記憶能力下降(P<0.05),其甲狀腺激素水平降低(P<0.05),說明孕前CFS雌鼠HPT軸功能紊亂。②模型組仔鼠出生時其生長發(fā)育較正常組仔鼠遲緩(P<0.01)。至出生后4周,其生長發(fā)育遲緩、學(xué)習(xí)記憶能力低下的狀況未見改善(P<0.01或P<0.05)。模型組仔鼠
7、血清T3、T4水平低下(P<0.01或P<0.05),表明模型組仔鼠HPT軸功能紊亂。③孕前CFS狀態(tài)雌鼠甲狀腺激素水平低下是仔鼠生長發(fā)育遲緩和學(xué)習(xí)記憶能力低下的重要原因之一,而仔鼠甲狀腺激素水平低下也是其生長發(fā)育遲緩和學(xué)習(xí)記憶能力低下的另一重要原因。④本實驗在中醫(yī)“形勞”、“神勞”的理論指導(dǎo)下建立的CFS雌性大鼠動物模型并觀察對仔代的影響,驗證了疲勞與氣、血和肝、脾、腎等臟腑有著密切的關(guān)系。⑤CFS雌鼠臟腑功能失調(diào)是仔鼠出生時生長發(fā)育
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