大鼠接觸腦脊液神核基質(zhì)金屬蛋白酶的分布及其在神經(jīng)病理性疼痛中的表達(dá).pdf

1、目的:研究基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)家族中MMP-9和MMP-2在正常大鼠腦實(shí)質(zhì)觸液核(Cerebrospinal fluid-contactingnucleus,CNS-CN)中的分布及其在神經(jīng)病理性疼痛刺激條件下的表達(dá)變化,探索觸液核與神經(jīng)病理性疼痛的關(guān)系及其物質(zhì)基礎(chǔ),為神經(jīng)病理性疼痛的治療提供新的思路。
　　 方法:采用可靠的大鼠側(cè)腦室注射霍亂毒素亞單位B與辣根過氧化物酶

2、復(fù)合物(cholera toxin subunit B labeled with horseradish peroxidase,CB-HRP)示蹤技術(shù)標(biāo)記觸液核,制作經(jīng)典的坐骨神經(jīng)慢性結(jié)扎損傷模型(Chronic constrictioninjury,CCI模型)模擬神經(jīng)病理性疼痛,用yon Frey纖維細(xì)絲和熱輻射儀測(cè)定大鼠行為學(xué)的變化,分別以機(jī)械縮足閾值(Mechanical withdrawal threshold,MWT)和熱縮

3、足潛伏期(Thermal withdrawal latency,TWL)對(duì)大鼠機(jī)械觸誘發(fā)痛和熱痛敏反應(yīng)進(jìn)行評(píng)分,應(yīng)用免疫熒光激光共聚焦顯微鏡技術(shù)對(duì)CB-HRP和MMP-9及MMP-2進(jìn)行雙標(biāo),觀察正常情況下觸液核是否有MMP-9和MMP-2的表達(dá),于術(shù)后1d、3d、7d、14d觀察神經(jīng)病理性疼痛條件下觸液核中MMP-9和MMP-2的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果:
　　 1.在正常大鼠CB-HRP標(biāo)記的觸液核中觀察到少量CB-H

4、RP/MMP-9雙重標(biāo)記神經(jīng)元,約占觸液核神經(jīng)元的9％;未觀察到CB-HRP/MMP-2雙標(biāo)神經(jīng)元;
　　 2.神經(jīng)病理性疼痛大鼠,于術(shù)后1d至術(shù)后14d,機(jī)械縮足閾值MWT和經(jīng)元;2.神經(jīng)病理性疼痛大鼠,于術(shù)后1d至術(shù)后14d,機(jī)械縮足閾值MWT和熱縮足潛伏期TWL均明顯降低(P＜0.05,vs Sham),術(shù)后7d數(shù)值最低(P＜0.05,vs Control);大鼠腦片CB-HRP/MMP-9雙標(biāo)神經(jīng)元計(jì)數(shù)在術(shù)后3d、7d、