苯乙烯致DNA損傷及相關(guān)調(diào)控酶mRNA表達(dá)橫斷面研究.pdf

1、[研究目的]
　　 1.了解職業(yè)苯乙烯工人接觸水平及健康損害情況；
　　 2.探討苯乙烯對(duì)職業(yè)工人的遺傳損傷效應(yīng)；
　　 3.以實(shí)時(shí)熒光定量為檢測(cè)平臺(tái)，探討接觸不同苯乙烯暴露水平對(duì)甲基轉(zhuǎn)移酶、乙?；竚RNA表達(dá)的影響。尋找其職業(yè)危害的生物標(biāo)志物，為職業(yè)接觸人群的健康監(jiān)護(hù)及危險(xiǎn)度評(píng)價(jià)提供理論依據(jù)，達(dá)到加強(qiáng)病因預(yù)防的目的。
　　 [研究方法]
　　 1.采用定點(diǎn)及個(gè)體采樣獲取不同暴露工人苯乙烯接觸水

2、平并通過(guò)苯乙烯作業(yè)工人職業(yè)衛(wèi)生學(xué)調(diào)查及相應(yīng)的職業(yè)健康體檢，獲取工人健康狀況基礎(chǔ)數(shù)據(jù)；
　　 2.采用胞質(zhì)分裂阻滯微核實(shí)驗(yàn)對(duì)不同暴露苯乙烯水平的作業(yè)工人進(jìn)行細(xì)胞遺傳毒性效應(yīng)研究；
　　 3.以SYBR Green I嵌合實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法檢測(cè)相關(guān)DNA甲基轉(zhuǎn)移酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、組蛋白甲基化酶HMT和甲基CPG結(jié)合蛋白(MeCP2)以及蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶HAT、組蛋白去乙酰酶HDAC的mRNA含

3、量表達(dá)，探討不同苯乙烯暴露工人對(duì)5種相關(guān)甲基轉(zhuǎn)移酶和2種相關(guān)乙?；竚RNA表達(dá)，初步探討表觀遺傳對(duì)相關(guān)調(diào)控酶的調(diào)控作用，尋找合適的生物標(biāo)志物。
　　 [研究結(jié)果]
　　 1.苯乙烯作業(yè)工人健康損害
　　 定點(diǎn)及個(gè)體檢測(cè)顯示苯乙烯接觸工人均處于苯乙烯高暴露水平；暴露組工人咳嗽、頭暈等癥狀的發(fā)生率明顯高于對(duì)照組工人（P<0.05），接觸丙酮、稀料等其他有機(jī)溶劑是危險(xiǎn)因素，其OR=8.920，95％CI(3.405，

4、23.368)。兩組臨床體檢結(jié)果如肝功、血常規(guī)、心電圖、尿常規(guī)、肝膽腎B超檢查等差異均無(wú)顯著性（P>0.05）。
　　 2.苯乙烯對(duì)DNA損傷檢測(cè)
　　 苯乙烯暴露組淋巴細(xì)胞微核率高于對(duì)照組，其DNA損傷程度差異有顯著性(P<0.05)，兩組在性別間無(wú)差異（P>0.05），未觀察到吸煙、飲酒等因素對(duì)微核率有影響（P>0.05）。
　　 3.苯乙烯對(duì)甲基轉(zhuǎn)移酶、乙?；竚RNA表達(dá)的影響
　　 苯乙烯暴露組

5、DNA甲基轉(zhuǎn)移酶DNMT1及組蛋白乙酰化酶HAT1 mRNA高表達(dá)于對(duì)照組，差異顯著（其P值分別為0.000，<0.001），組蛋白甲基化酶HMT mRNA表達(dá)在兩組間差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；DNA甲基轉(zhuǎn)移酶DNMT3A、DNMT3B、甲基CPG結(jié)合蛋白MeCP2以及組蛋白去乙酰酶HDAC mRNA表達(dá)含量?jī)山M比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在男性組中僅有HAT1的mRNA相對(duì)表達(dá)含量暴露組高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)

6、意義(P<0.001)；在女性組中DNMTlmRNA及HATlmRNA的相對(duì)表達(dá)含量，暴露組明顯高于對(duì)照組，具有顯著性差異（P值分別為0.002，0.001），其他調(diào)控酶mRNA的表達(dá)差異不顯著(P>0.05)。
　　 [研究結(jié)論]
　　 1.苯乙烯能夠引起工人如咳嗽、頭暈等癥狀的發(fā)生，并且在丙酮、稀料等有機(jī)溶劑的作用下會(huì)加劇機(jī)體反應(yīng)程度。短年限暴露苯乙烯對(duì)工人的身體損傷不明顯，其損傷效應(yīng)還有待于繼續(xù)觀察。
　　

7、 2.苯乙烯暴露對(duì)人外周血淋巴細(xì)胞微核率有影響，并呈現(xiàn)一定的遺傳毒性作用，雙核微核可作為其早期遺傳損傷的指標(biāo)。
　　 3.苯乙烯暴露可引起基因表達(dá)調(diào)控酶DNMT1、HMT及HAT1的mRNA不同程度的高表達(dá)，可作為其遺傳損傷早期效應(yīng)標(biāo)志物，而對(duì)其他基因表達(dá)調(diào)控酶DNMT3a、DNMT3b、MeCP2及HDAC10的mRNA表達(dá)沒(méi)有顯著影響。HAT1mRNA在苯乙烯暴露的男性組、女性組中均高表達(dá)，DNMT1mRNA在女性苯乙烯暴露