膠原基復(fù)合組織修復(fù)材料的研制及應(yīng)用基礎(chǔ)研究.pdf

1、本課題選擇具有很好細(xì)胞黏附作用的膠原和具有促進(jìn)細(xì)胞遷移、黏附和增生作用的透明質(zhì)酸鈉為原材料，將二者復(fù)合，制備成具有多層結(jié)構(gòu)的膠原膜，使其具有隔膜和促進(jìn)組織再生的雙重功能。通過(guò)對(duì)其的安全性評(píng)價(jià)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床病例使用情況的考察，為臨床提供一種新型的引導(dǎo)組織再生材料。 具體研究工作如下： 1.工型膠原、透明質(zhì)酸鈉為主材料，經(jīng)過(guò)氧化、預(yù)冷凍、冷凍干燥、化學(xué)交聯(lián)等制備工藝，制備了一種一層是單一組分、結(jié)構(gòu)致密的膠原層、另一層為結(jié)構(gòu)

2、疏松的膠原與透明質(zhì)酸鈉混合物的雙層結(jié)構(gòu)復(fù)合材料，并進(jìn)行理化性能表征。 2.按照GB/T16886(IS010993)系列標(biāo)準(zhǔn)等對(duì)所研制的復(fù)合材料進(jìn)行了系統(tǒng)的安全性評(píng)價(jià)研究。評(píng)價(jià)內(nèi)容包括：細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)、致敏實(shí)驗(yàn)、皮內(nèi)刺激實(shí)驗(yàn)、急性全身毒性實(shí)驗(yàn)、溶血實(shí)驗(yàn)、熱原實(shí)驗(yàn)、植入實(shí)驗(yàn)、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)、沙門(mén)氏菌誘變性實(shí)驗(yàn)(Ames實(shí)驗(yàn))、小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)、中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢癌(CHL)細(xì)胞染色體畸變實(shí)驗(yàn)。 3.建立肌腱損傷模型，將膠原/膠原-透明

3、質(zhì)酸鈉雙層復(fù)合材料用于損傷修復(fù)，通過(guò)組織病理學(xué)方法考察其肌腱組織損傷修復(fù)的隔膜作用，及選擇性地引導(dǎo)內(nèi)源性肌腱細(xì)胞向受損的部位附著、增生和促進(jìn)組織修復(fù)的功能。 4.由腭裂和外傷、腫瘤等造成的腭部軟硬組織缺損，目前臨床采用的局部黏骨膜瓣等的轉(zhuǎn)移來(lái)關(guān)閉缺損間隙，手術(shù)整復(fù)方法存在一定的不足；本實(shí)驗(yàn)在獲得制品臨床實(shí)驗(yàn)批準(zhǔn)文件后，探討該材料對(duì)腭部軟組織的引導(dǎo)再生修復(fù)作用。 5．選用膠原/膠原-透明質(zhì)酸鈉雙層結(jié)構(gòu)復(fù)合材料作為血管組織工

4、程支架材料，并在支架上種植血管平滑肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞，通過(guò)光鏡、掃描電鏡，觀察細(xì)胞與支架材料的融合及生長(zhǎng)情況，研究支架材料的細(xì)胞相容性，探索該復(fù)合材料在組織工程血管構(gòu)建中作為支架材料的可能性。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：所制備的膠原/膠原-透明質(zhì)酸鈉復(fù)合材料具有兩層結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，二層結(jié)構(gòu)疏松、另一層較為致密；雙層結(jié)構(gòu)結(jié)合緊密，膠原和透明質(zhì)酸鈉形成了有效的復(fù)合，理化指標(biāo)結(jié)果符合體內(nèi)植入物要求；系統(tǒng)的安全性評(píng)價(jià)結(jié)果顯示復(fù)合材料細(xì)胞毒符合要求，無(wú)溶血作

5、用，無(wú)皮內(nèi)刺激反應(yīng)、無(wú)致敏反應(yīng)、無(wú)急性全身毒性反應(yīng)、無(wú)熱原反應(yīng)、植入實(shí)驗(yàn)符合體內(nèi)植入物反應(yīng)指標(biāo)、無(wú)菌、無(wú)遺傳毒性。材料具有良好的生物相容性。 進(jìn)一步的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：材料植入后，組織反應(yīng)符合要求；由于存在內(nèi)源性和外源性修復(fù)兩種修復(fù)機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)條件下，復(fù)合材料起到了隔膜作用，減少外源性修復(fù)的參與，防止肌腱粘連形成，并對(duì)肌腱損傷有引導(dǎo)再生效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果也提示通過(guò)引導(dǎo)組織再生技術(shù)可能可以用于一些肌腱損傷的修復(fù)治療。進(jìn)一步對(duì)腭部軟組織