光催化劑TiO-,2-對(duì)晶狀體上皮細(xì)胞生長(zhǎng)及殺傷作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的研究光催化劑TiO2對(duì)牛晶狀體上皮細(xì)胞生長(zhǎng)的影響以及經(jīng)長(zhǎng)波紫外線(UVA)激發(fā)后Ti02對(duì)細(xì)胞的殺傷作用和機(jī)制。探討光催化劑TiO2應(yīng)用于防治后發(fā)性白內(nèi)障的可能性。 方法不同濃度的TiO2與牛晶狀體上皮細(xì)胞共同培養(yǎng)，采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法和流式細(xì)胞技術(shù)(FCM)測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和細(xì)胞生長(zhǎng)周期。采用MTT比色法、臺(tái)盼藍(lán)拒染法、吖啶橙／溴化乙啶(A0／朗)染色法、DNA瓊脂糖凝膠電泳以及電鏡技術(shù)觀察經(jīng)UVA激發(fā)的TiO2對(duì)牛

2、晶狀體上皮細(xì)胞的殺傷狀況和形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果不同濃度的TiO2與牛晶狀體上皮細(xì)胞共同培養(yǎng)后，Ti02顆粒通過(guò)細(xì)胞吞噬作用進(jìn)入胞質(zhì)中；牛晶狀體上皮細(xì)胞生長(zhǎng)速度隨著Ti02濃度升高而下降，200ug向1TiO2組作用48h生長(zhǎng)抑制作用最大，此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)周期示增殖指數(shù)下降，與對(duì)照組相比有顯著性差異(P=0.001)；在WA激發(fā)下TiO2對(duì)牛晶狀體上皮細(xì)胞殺傷率隨著TiO2濃度增加和激發(fā)時(shí)間延長(zhǎng)而增加，MTT比色法測(cè)定只有TiO2作用濃

3、度達(dá)到150ug/ml且激發(fā)時(shí)間超過(guò)30min或濃度達(dá)到200ug/ml，其殺傷作用與對(duì)照組相比才有顯著性差異(160ug／mlTiO2組激發(fā)30min，40min及200ug/mlTiO2組激發(fā)20min，30min，40min與對(duì)照組比較的P值分別為0.00l，0.003，0.007，0.00l和0．0∞)；進(jìn)一步用臺(tái)盼藍(lán)拒染法和A0／明染色法證實(shí)200ug／mlTiO2組照射30min以上殺傷作用與對(duì)照組相比有顯著性差異(P值均為

4、0.000)；200ug/mlTiO2組照射30min以上提取DNA進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳顯示樣品電泳遷移速率大于對(duì)照組，在電鏡下觀察到大量細(xì)胞有壞死超微結(jié)構(gòu)改變。 結(jié)論光催化劑TiO2可以抑制體外牛晶狀體上皮細(xì)胞正常生長(zhǎng)。在UVA的激發(fā)下TiO2可以明顯殺傷牛晶狀體上皮細(xì)胞，殺傷效應(yīng)具有時(shí)效和量效關(guān)系。其機(jī)理可能是：TiO2通過(guò)影響細(xì)胞周期導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)抑制。經(jīng)UVA激發(fā)后在晶狀體上皮細(xì)胞表面和細(xì)胞漿中產(chǎn)生活性氧物質(zhì)氧化細(xì)胞膜使其破