補腎、活血、化痰三法的不同配伍方藥對小鼠腦缺血再灌注擬血管性癡呆防治作用的比較研究.pdf

1、目的：血管性癡呆(VD)是因腦血管疾病所致的智能及認知功能障礙臨床綜合征。臨床表現以伴發(fā)腦血管病而發(fā)生癡呆為特征。中醫(yī)藥治療VD具有豐富的實踐經驗，在延緩病情進展、改善病人全身癥狀，一定程度上改善智能狀態(tài)等方面表現出優(yōu)勢，但關于中醫(yī)藥作用機制的研究還比較薄弱，致使中醫(yī)藥防治VD的客觀性、科學性不強。沒有人系統比較不同治法組合配伍后的防治效果和作用機制。在前期工作中已經證實了臨床上常用的補腎、化痰、活血三法確有保護腦組織、改善記憶能力的作

2、用。本實驗的目的是從整體、組織和分子水平對不同治法配伍后的防治作用進行比較及闡明其作用機制，進而揭示VD的病因病機。這將為中醫(yī)臨床制定合理的治則治法奠定基礎，為提高臨床療效提供科學依據。 方法：將120只♂KM小鼠適應性飼養(yǎng)一周后，隨機分為7組，即假手術組、模型組、喜得鎮(zhèn)組、補腎化痰藥組、補腎活血藥組、活血化痰藥組、補腎活血化痰藥組。補腎化痰藥、補腎活血藥和活血化痰藥用量均為32g/kg，濃度為(含生藥)3.2g/mL；補腎活血

3、化痰藥用量為40g/kg，濃度為(含生藥)4.0g/mL；喜得鎮(zhèn)用量為0.77mg/kg，用時用生理鹽水配制成濃度為0.077mg/mL的藥液。各組均術前10d開始灌胃，灌胃量為1mL/100g，假手術組和模型組灌服等量生理鹽水，每天1次。手術當天提前2h灌胃，直至術后15d。造模時將小鼠用水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉，消毒，頸正中切口，體視顯微鏡下分離雙側頸總動脈，套4號絲線扣備用。拉緊絲扣，阻斷血流20min，同時在距尾尖1

4、cm處剪斷放血約0.3mL，熱凝止血。松開絲扣灌注10min后，再次阻斷血流20min，第2次再灌后觀察30min，縫合皮膚。術后每日肌注青霉素0.2萬U，連續(xù)3d。其中假手術組只分離頸總動脈，套絲扣，但不阻斷血流，尾部不放血，觀察時間等與其它組相同。術后第14、15進行行為學實驗，第16天將小鼠分批斷頭，冰盤上快速剖取全腦，棄去嗅球及小腦。每組隨機取3個全腦用10％甲醛溶液固定，留作組織切片進行病理形態(tài)學觀察；其余大腦用冰生理鹽水沖洗

5、血液，再用濾紙拭干，電子天平稱重后加入9倍冷生理鹽水，在玻璃勻漿器中研磨成10％勻漿，4℃、3600r/min離心5min，提取上清液，-20℃凍存待檢。檢測指標為超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、乙酰膽堿酯酶(AchE)、谷氨酸(Glu)。嚴格按照試劑盒說明書操作。 結論： 1.實驗證實臨床上常用的活血、補腎、化痰三法不同配伍的中藥復方確實均能提高VD小鼠的學習記憶成

6、績、改善相關的生化指標，具有保護腦組織、防治小鼠VD的作用。 2.補腎活血化痰法防治小鼠VD的療效優(yōu)于其他治法。 3.活血、補腎、化痰三法不同配伍的中藥復方防治小鼠VD的作用機制可能為：通過升高小鼠腦組織中SOD、AchE含量，降低MDA、NOS、NO、Glu含量來起到防治VD的作用。 4.腎虛、血瘀、痰濁為VD最基本的病因病機，而補腎活血化痰法為防治VD最基本的方法。 5.臨床上治療VD病人應遵循辨證論