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文檔簡介
1、目的:研究紅花注射液(SI)對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)增殖及表達(dá)黏附分子VCAM-1和E—selectin的影響,以探討其在造血干細(xì)胞動員中的作用。方法:(1)建立人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)模型,用免疫細(xì)胞化學(xué)方法、光學(xué)顯微鏡及電子顯微鏡從形態(tài)學(xué)角度鑒定內(nèi)皮細(xì)胞;(2)測定臍帶離體時間及培養(yǎng)液pH值對HUVEC生長的影響;(3)采用不同濃度紅花注射液(0μg/ml、4tμg/ml、40μg/ml,400μg/ml)培養(yǎng)HUVEC,用
2、MTI、法、ELISA法檢測在不同濃度SI作用下內(nèi)皮細(xì)胞增殖及黏附分子VCAM-1和E-selectin表達(dá)的變化。結(jié)果:(1)成功的建立了人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外模型;Ⅷ因子相關(guān)抗原免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果為陽性、電鏡檢測到w—P小體,證實培養(yǎng)細(xì)胞為人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;(2)各濃度紅花注射液(4μg/ml、40μg/ml,400μg/ml)組培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,但與對照組(0μg/ml)比較無顯著性差異。(Time:P 3、oncentration:P>0.05);(3)體外培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞可自然分泌VCAM—l。各紅花注射液組(4μg/ml、40μg/ml、400μg/ml)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)VCAM—l均明顯低于對照組(0μg/ml組)(P<0.05),且SI可下調(diào)TNF-a的促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)VCAM-1的作用(P<0.05);(4)體外培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞在沒有任何刺激的情況下未檢測到E-selectin。內(nèi)皮細(xì)胞在TNF—a刺激活化后可表達(dá)E—selectin(
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