老年人血清對人臍靜脈內(nèi)皮細胞功能的影響.pdf

1、目的：
　　以人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVECs）為實驗材料，以健康老年人及老年高血壓患者血清作為損傷因素，建立反映健康老年人及老年高血壓患者特點的內(nèi)皮細胞損傷模型，采用MTT比色法檢測不同處理組血清對血管內(nèi)皮細胞增殖的的影響，通過測定各組內(nèi)皮細胞中一氧化氮（NO）、內(nèi)皮素-1（ET-1）、活性氧（ROS）的變化，探討老年人血清對人臍靜脈內(nèi)皮細胞功能的影響。
　　方法：
　　取南昌大學第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科新生兒臍帶提取人臍靜

2、脈內(nèi)皮細胞并鑒定，培養(yǎng)3-5代待用，收集健康青年人、正常老年人、老年高血壓患者血清各20份，實驗按空白對照組、正常青年組、正常老年組、老年高血壓組分組，空白組只加培養(yǎng)基，不加血清，各組分別與人臍靜脈內(nèi)皮細胞孵育，在不同時間段收集細胞上清液及細胞，采用MTT方法檢測各組血清對內(nèi)皮細胞增殖情況的影響，采用氧化還原方法檢測各組細胞上清液NO含量，酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測ET-1含量，流式細胞儀檢測各組細胞內(nèi)ROS釋放量，采用統(tǒng)計學方法處理數(shù)據(jù)結(jié)果

3、，比較各組結(jié)果有無差別。
　　結(jié)果：
　　1.各組細胞在不同時間段細胞增殖活力也無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。在同一時間點，健康青年組、健康老年組及老年高血壓組細胞增殖活力在統(tǒng)計學上無顯著差異（P>0.05），空白對照組與其他三組細胞增殖活力在統(tǒng)計學上均有顯著差異（P<0.05）；
　　2.各處理組血清與內(nèi)皮細胞孵育12h、24h后，在同一時間點，健康青年組、健康老年組、老年高血壓組內(nèi)皮細胞釋放NO均呈梯度降低，差異具

4、有統(tǒng)計學意義（P<0.01），各組內(nèi)皮細胞培養(yǎng)24h NO釋放量比12h NO釋放量增加，但差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；
　　3.各實驗組血清與內(nèi)皮細胞孵育12h、24h后，在同一時間點，健康青年組、健康老年組、老年高血壓組內(nèi)皮細胞釋放ET-1均呈梯度增高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.01），各組內(nèi)皮細胞培養(yǎng)24h ET-1釋放量比12h ET-1釋放量增加，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；
　　4.各實驗組血清與