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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察柴樸湯含藥血清對(duì)氣道上皮細(xì)胞Eotaxin和STAT6表達(dá)的影響,探討柴樸湯含藥血清治療哮喘的分子機(jī)制。
方法:將48只雄性SD大鼠分為哮喘組、正常對(duì)照組及柴樸湯組,制備哮喘血清、正常大鼠血清及柴樸湯含藥血清,將氣道上皮細(xì)胞(Rat Trachea Epithelial,RTE)分為哮喘組(A組)、正常對(duì)照組(B組)與柴樸湯低劑量組0.75g/kg(C組)、柴樸湯中劑量組1.5g/kg(D組)、柴樸湯高劑量組3.0g
2、/kg(E組)和空白對(duì)照組(F組)。免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)Eotaxin和STAT6的蛋白在RTE中的表達(dá);半定量RT-PCR檢測(cè)RTE中Eotaxin和STAT6的mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:HE染色顯示:正常大鼠氣道周圍無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn);哮喘大鼠支氣管及血管周圍有大量嗜酸性細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),部分氣道上皮脫落,氣道平滑肌增厚,基底膜增厚,氣道壁增厚,氣道管腔狹窄。
免疫細(xì)胞化學(xué)蛋白半定量分析:A組Eotaxin、STAT6
3、蛋白的OD值較F組明顯增高,B、C、D、E組OD值介于兩者之間。各組Eotaxin的OD值分別為:A組0.37±0.04、B組0.31±0.02、C組0.23±0.02、D組0.22±0.03、E組0.21±0.01、F組0.16±0.03。各組STAT6的OD值分別為:A組1.35±0.08、B組1.14±0.12、C組0.60±0.08、D組0.51±0.07、E組0.44±0.07、F組0.43±0.04。A組與F組比較,差異有顯
4、著性(P<0.05);A、F組與B組比較,差異有顯著性(P<0.05);A組與C、D、E組相比較,差異有顯著性(P<0.05);C組與D組,D組與E組比較,差異無(wú)顯著性(P>0.05);另外STAT6的C組與E組相比差異有顯著性(P<0.05)。
RT-PCR半定量分析,Eotaxin的mRNA相對(duì)灰度值測(cè)定:A組Eotaxin mRNA的相對(duì)灰度值較F組明顯增高,B、C、D、E組相對(duì)灰度值介于兩者之間。各組Eotaxin的相
5、對(duì)灰度值分別為:A組0.58±0.05、B組0.57±0.06、C組0.54±0.03、D組0.32±0.03、E組0.31±0.03、F組0.30±0.03。A組與F組比較,差異有顯著性(P<0.05);A組與D、E組相比較差異有顯著性(P<0.05),D組與E組相比差異無(wú)顯著性(P>0.05);A組與C組相比較差異無(wú)顯著性(P>0.05)。
STAT6的mRNA相對(duì)灰度值測(cè)定:A組STAT6 mRNA的相對(duì)灰度值較空白對(duì)照
6、組明顯增高,B、C、D、E組相對(duì)灰度值介于兩者之間。各組STAT6的相對(duì)灰度值分別為:A組1.32±0.06、B組1.21±0.08、C組0.83±0.03、D組0.54±0.04、E組0.45±0.02、F組0.32±0.02。A組與F組比較,差異有顯著性(P<0.05);A、F組與B組比較,差異有顯著性(P<0.05);A組與C、D、E組相比較,差異有顯著性(P<0.05);C組與E組,C組與D組,D組與E組相比差異有顯著性(P<0
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