廣金錢草及土大黃有效成分研究與應(yīng)用.pdf

1、廣金錢草為豆科山螞蝗屬植物Desmodiumstyracifolium(0sbeck)Merr.，藥用部位為干燥地上部分，主要化學(xué)成分為黃酮、皂苷、多糖、生物堿等化合物，為《中國藥典》收載的常用中藥材及成方制劑“石淋通片”的主要原料藥。具有清熱除濕，利尿通淋之功效。用于熱淋、沙淋、石淋、小便澀痛、水腫尿少、黃疸尿赤、尿路結(jié)石。到目前為止，其防治尿石癥的有效成分雖有一些研究報道，但均不十分明確。我國藥典尚未收載廣金錢草原藥材及石淋通片的含

2、量測定方法，且石淋通片采用傳統(tǒng)水提醇沉法工藝制得的浸膏片，存在服用量大，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)難以控制等缺陷。 土大黃苷為蓼科蓼屬植物中提取分離得到的二苯乙烯類化合物，本室對其進行的初步藥理試驗研究表明，此化合物對糖尿病模型動物具有降血糖作用。自從1940年首次從毛藜蘆的根中分離出白藜蘆醇以來，人們就對二苯乙烯類化合物進行了廣泛的研究。此類化合物存在于許多植物中，是具有廣泛的生理活性的化合物。以往研究報道總的來說主要有抗氧化、抗腫瘤、抗瘀血綜

3、合癥(腦炎、動脈粥樣硬化、慢性炎癥)、激活巨噬細胞、抗血小板凝結(jié)、抗過敏、消除自由基等生理活性。國內(nèi)曾有廠家將其開發(fā)成降血脂藥物，但因生產(chǎn)工藝落后，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)水平低，產(chǎn)品純度達不到90％以上，現(xiàn)已處于停產(chǎn)狀態(tài)。 為了解決以上存在的問題，繼而開發(fā)出較高水平的中藥新藥，本研究在對廣金錢草及土大黃的有效成分進行藥理篩選的基礎(chǔ)上，對有效成分的中試制備工藝進行研究，繼而開展了化學(xué)對照品的分離、定性定量檢測方法、藥理藥效等一系列實驗研究。

4、 1夏佛塔苷及土大黃苷的分離與純化：天然產(chǎn)物成分復(fù)雜，含量相對較低，提取分離一定量的單體成分有相當(dāng)難度。本研究采用常規(guī)柱層析及反復(fù)重結(jié)晶，結(jié)合制備型HPLC法，分離純化得到了夏佛塔苷及土大黃苷單體，經(jīng)UV、IR、MS、NMR光譜鑒定及HPLC純度檢驗，純度均達到98％以上，可作為含量測定用化學(xué)對照品。 2定性定量檢測方法研究：在分離得到化學(xué)對照品夏佛塔苷及土大黃苷的前提下，利用紫外分光光度法及高效液相色譜法，進行了廣金錢草中

5、試樣品總黃酮及夏佛塔苷的含量測定、土大黃苷中試樣品的含量測定方法研究。同時進行了廣金錢草總黃酮中大孔樹脂有機小分子殘留物的含量測定、重金屬及砷鹽的含量測定。結(jié)果表明，廣金錢草中試樣品總黃酮含量超過50％，夏佛塔苷含量超過4.5％，土大黃苷在中試樣品中含量超過90％，廣金錢草中試樣品中重金屬小于10ppm，砷鹽小于2ppm。 3中試制備工藝研究：在建立含量測定方法的基礎(chǔ)上，以總黃酮為指標(biāo)，采用正交設(shè)計法，對廣金錢草總黃酮的最佳提取

6、工藝及大孔樹脂分離純化總黃酮最佳工藝進行了實驗研究。結(jié)果表明，以80％乙醇提取兩次，提取率達90％以上，用大孔樹脂法分離純化的總黃酮含量達50％以上；以土大黃苷為指標(biāo)，采用正交設(shè)計法，對土大黃苷的最佳提取工藝及不同大孔樹脂對土大黃苷的吸附進行了比較研究，結(jié)果表明，用大孔樹脂法分離純化的土大黃苷，含量達90％以上。 4抗氧化作用及藥效實驗研究：采用自旋捕集和電子順磁共振技術(shù)對廣金錢草總黃酮、土大黃苷清除活性氧自由基的作用進行了研究