HIF-1α和P33ING1在食管癌組織中的表達(dá)及其意義.pdf

1、缺氧誘導(dǎo)因子HIF-1(hypoxia-induciblefactor-1,HIF-1)是90年代初發(fā)現(xiàn)的由缺氧誘導(dǎo)產(chǎn)生，能與促紅細(xì)胞生成素基因上的缺氧反應(yīng)元件(hypoxiaresponseelements，HRE)結(jié)合，從而促進(jìn)EPO轉(zhuǎn)錄的新的轉(zhuǎn)錄因子。它是由α和β2個亞單位組成的異二聚體，細(xì)胞內(nèi)氧的水平能夠調(diào)節(jié)HIF-1α亞單位的穩(wěn)定性、及亞細(xì)胞定位并能促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄。研究表明，HIF-1α在許多惡性腫瘤組織中普遍高表達(dá)，其活性對維持

2、腫瘤細(xì)胞的能量代謝、新血管生成、促進(jìn)腫瘤增殖及抑制凋亡和促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移中起著重要作用，有望成為惡性腫瘤早期診斷、判斷預(yù)后的一種新標(biāo)記物。P33ING1(Inhibitorofgrowth)是一新的與P53密切相關(guān)的凋亡相關(guān)因子，有細(xì)胞生長抑制作用及促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用。有研究表明P33ING1的過表達(dá)可促進(jìn)由“血清饑餓”誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，而轉(zhuǎn)染反義RNA則可抑制“血清饑餓”導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡。那么兩者在食管癌的發(fā)生發(fā)展中是否具有協(xié)同作用?目前尚未

3、見報道。本實驗利用免疫組化方法檢測了HIF-1α及P33ING1在食管癌組織中的表達(dá)，探討了HIF-1α及P33ING1表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系，并對食管癌組織中的HIF-1α和P33ING1的表達(dá)進(jìn)行了相關(guān)性分析；用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測了食管癌細(xì)胞系Eca109,Eca9706中HIF-1α及P33ING1的表達(dá)。從而探討食管癌發(fā)生發(fā)展的可能機制，并為食管癌的診斷治療和判斷預(yù)后提供理論依據(jù)。 方法；1.本實驗采用免疫組織化學(xué)S

4、-P(StreptavidinPeroxidase)方法檢測了100例食管鱗癌組織中HIF-1α和P33ING1蛋白的表達(dá)。每例標(biāo)本均選取癌組織中心區(qū)并以其遠(yuǎn)端正常粘膜作對照。100例鱗癌組織的組織學(xué)分級：高分化(Ⅰ級)25例，中分化(Ⅱ級)64例，低分化(Ⅲ級)11例；100例鱗癌組織的浸潤深度：侵及粘膜下層或淺肌層(淺層)35例，侵及深肌層或外膜(深層)65例；100例中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者22例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者78例。 2.細(xì)胞

5、系及細(xì)胞培養(yǎng)：食管鱗癌細(xì)胞系Eca109、Eca9706在含有10％的胎牛血清，100U/ml青霉素，100μg/ml鏈霉素的1640培養(yǎng)液中生長，并置于37℃，5％CO2的條件下培養(yǎng)。實驗所用細(xì)胞均處于對數(shù)生長期。采用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測HIF-1α蛋白和P33ING1蛋白在Eca109和Eca9706細(xì)胞系中的表達(dá)。 3.統(tǒng)計學(xué)分析：應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計軟件包對所有資料進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。采用χ2檢驗、Kendall相關(guān)性分

6、析。以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)。 結(jié)果1.HIF-1α在食管癌組織中的表達(dá)(陽性率90.00％)明顯高于其在正常粘膜組織中的表達(dá)(陽性率58.00％)(χ2=26.611，P=0.000)。 2.HIF-1α在深層浸潤組中的表達(dá)(陽性率95.38％)高于其在淺層浸潤組中的表達(dá)(陽性率80.00％)(χ2=5.983，P=0.014)。 3.HIF-1α在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的表達(dá)(陽性率90.91％)及其在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組

7、中的表達(dá)(陽性率89.74％)未見差異(χ2=0.026，P=0.872)，HIF-1α在高分化組中的表達(dá)(陽性率88.00％)和其在中低分化組中的表達(dá)亦(陽性率90.70％)未見差異(χ2=0.148，P=0.700)。 4.P33ING1在正常粘膜組織中的表達(dá)(陽性率91.00％)明顯高于其在食管癌組織中的表達(dá)(陽性率48.00％)(χ2=3.614P=0.000)。 5.P33ING1蛋白在食管癌高分化組中的表達(dá)(

8、陽性率68.00％)明顯高于其在中低分化組中的表達(dá)(陽性率41.34％)(χ2=5.432，P=0.021)。 6.P33ING1在深層浸潤組中的表達(dá)(陽性率44.62％)和其在淺層浸潤組中的表達(dá)(陽性率54.29％)未見差異(χ2=0.852P=0.356)；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的表達(dá)(陽性率50.00％)和其在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的表達(dá)(陽性率47.44％)亦未見差異(χ2=0，045，P=0.832)。 7.P33ING

9、1與HIF-1α在食管癌組織中的表達(dá)未見明顯相關(guān)性(χ2=1.287，P=0.257)。 8.HIF-1α在食管癌細(xì)胞系Eca109,Eca9706中均無表達(dá),P33在食管癌細(xì)胞系Eca109中有表達(dá)，在Eca9706中無表達(dá)。 結(jié)論1.HIF-1α在食管癌組織中高表達(dá)且與食管癌的浸潤深度有關(guān)，提示HIF-1α可作為判斷食管粘膜上皮惡性轉(zhuǎn)化及預(yù)后判斷的指標(biāo)。 2.P33ING1在食管癌組織中低表達(dá)并與食管癌的分化