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1、目的:探討?;疓hrelin能否保護(hù)胰島β細(xì)胞免遭巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥損傷。
方法:采用Transwell小室構(gòu)建小鼠胰島細(xì)胞株MIN6和巨噬細(xì)胞株RAW264.7的共培養(yǎng)系統(tǒng)。共培養(yǎng)前4h,在RAW264.7巨噬細(xì)胞中分別加入酰基化ghrelin(10、100、500nmol/L)。共培養(yǎng)48h后,用實時定量PCR和Westernblotting檢測RAW264.7巨噬細(xì)胞上TLR4和脂肪酸結(jié)合蛋白(A-FABP)的表達(dá),用
2、ELISA檢測細(xì)胞上清液中白細(xì)胞介素(IL-1)β和腫瘤壞死因子(TNF)-α的濃度,此外,分別用含葡萄糖3mmol/L、30mmol/L的KRBH液孵育MIN6胰島細(xì)胞1h,用ELISA測定細(xì)胞上清液中胰島素的濃度。
結(jié)果:(1)與巨噬細(xì)胞對照組比較,共培養(yǎng)后,巨噬細(xì)胞TLR4和A-FABP的表達(dá)水平以及細(xì)胞上清液中IL-1β和TNF-α的濃度都顯著增高(P<0.05);(2)與胰島β細(xì)胞對照組比較,共培養(yǎng)后,高糖刺激的胰島
3、素分泌水平降低(P<0.05);與共培養(yǎng)對照組比較,酰基化ghrelin干預(yù)后再進(jìn)行共培養(yǎng),巨噬細(xì)胞TLR4和A-FABP的表達(dá)水平以及細(xì)胞上清液中的IL-1β和TNF-α的濃度都顯著降低(P<0.05),而且呈劑量依賴性。
結(jié)論:(1)巨噬細(xì)胞與胰島β細(xì)胞共培養(yǎng)后,可活化炎癥通路,釋放炎癥因子,損傷胰島β細(xì)胞的胰島素分泌功能;(2)?;痝hrelin可劑量依賴性削弱巨噬細(xì)胞和胰島β細(xì)胞共培養(yǎng)后炎癥通路的活化和炎癥因子的釋放
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